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實驗動物屏障設施的溫度和濕度需要常年保持在一定范圍內，而這些的實現均需通過空調系統完成。近年來，實驗動物屏障設施的空調系統統以全新風直流式潔凈中央空調系統為主。盡管建設之初投資運轉費用較高，但老式的回風進人潔凈區，可能引起各區域之間交叉污染和氣味累的問題，而全新風空調方式在此方面顯示了較大的優越性。因為夏季降溫、冬季取暖都是使用一套設備來完成的，這就存在運行模式轉換的問題，因此可以通過熱泵實現節能的目的。根據泵吸取熱量的低溫熱源種類的不同，熱泵大致可分為空氣源熱泵、地源熱泵、復合熱泵。

新風經空調機組新風段進入初效過濾段初步過濾新風中的塵埃顆粒，進入表冷段對空氣進行冷卻除濕，再經過加熱、加濕段對空氣進行加熱及加濕，再經風機段將空氣送出，最經中效過濾段對空氣進行過濾送往室內。空調系統末端設置風量調節閥、末端空氣加熱器高效過濾器，最終將符合室內溫濕度要求、潔凈度要求的空氣送入房間。為避免一部分未經過過濾的空氣滲透到風機段吸人端，中效過濾器通常放置在空調機組末端，保證所有供給空氣都經過中效過濾段。機組內部的加熱器、加濕器、表冷器并不同時使用，應根據實際情況分別使用。

房間內的空氣經末端風量調節閥及排風機排出室外，末端風量調節閥宜為電動閥門，可自動控制房間的相對壓差。排出空氣需經過一定的處理，以滿足環保要求。實驗動物設施常用的廢氣處理技術通常有吸附法、吸收法和光催化氧化法等。

此外，在空調通風系統中，新風能耗占了較大的比例。實驗動物屏障設施內有新風進入，必有等量的室內空氣緩慢排出。這些排風相對于新風來說，含有熱量(冬季)或冷量(夏季)。屏障系統的排風是有組織的，因此有可能通過新風與排風的熱濕交換，從排風中回收熱量或冷量減少新風的能耗。

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