發布時間：2023-02-21 06:18:55
序言：寫作是分享個人見解和探索未知領域的橋梁，我們為您精選了8篇的高一數學學習計劃樣本，期待這些樣本能夠為您提供豐富的參考和啟發，請盡情閱讀。
【摘 要】學習高中數學，會有好些學困生，學困生產生的原因是什么？作為我們一線數學教師，對這些學生考生又如何轉化呢？針對以上兩個問題，本文主要略談筆者對以上兩個問題的幾點看法。
關鍵詞 學困生；轉化建議
1.高中數學學困生的成因分析
1.1學習數學的意志、情感脆弱。好些高中數學學困生數學成績不大理想的原因其實并不是他們的智力不好，而主要這些學生缺乏自覺意識和頑強的意志，缺乏學好數學的毅力和勇氣，具體表現在:思想上，對待學習目的不明確、態度不夠端正，認為學習的目的是為了應付親人或應付老師的期盼和要求；意志、情感上，由于他們害怕困難、害怕挫折，因此害怕學習，不愿花精力和時間去啃稍難的題目，寧愿做一個學習上的懦夫；行為上，課前課后，從來不預習、復習課本內容，學習數學常常“三天打魚，兩天曬網”，不能堅持不懈，課堂上，老是希望老師直接將數學知識傳授給自己，自己不愿意主動去思考問題、分析問題、解決問題，學習數學對老師的依賴性較強。
1.2學習思維問題。嚴密的邏輯性、概括性和很抽象等是高中數學最主要的特點。高中數學學困生的思維主要有以下幾個特點：數學問題考慮的不透，即只能看到事物的表面現象，看不到事物的本質；不會讀題、不會挖掘數學題目的隱含條件、不會靈活運用數學公式，只會死記硬背一些概念、公式、定理、定律等；思維較遲鈍、呆板，相同的題目，優等生往往能舉一反三，觸類旁通，能較快的回憶起相關知識點，而學困生即使會也只是就題論題，做不到相應的聯想和靈活的變通，多數時候是漏洞百出、顧此失彼，正因為如此，學困生往往學習數學時，思維缺少靈活性、創造性。
1.3學習方法問題。部分數學學困生也不是學習不認真、不努力，他們中也有好些人學習非常刻苦，甚至“爭分奪秒、秉燭夜讀”，但是數學成績老是不突出，總結其主要原因是這些同學沒有科學的學習方法。他們往往課前不會預習教材，課堂上不會聽講、不會思考，不會抓住知識重點、難點，課后又不會如何復習，對于老師講解的知識只會機械的記憶，不去理解、感悟。因此，學習方法的不科學也造成他們學習數學困難。
1.4家長、教師問題。由于受高考升學的壓力，無論是教師還是家長對學生的期望都很高，把學生的成績都看的很重，數學學困生的基礎原本就差，他們知識結構也不夠完整，他們的思維也不可能在短時間內都達到較高的水平，他們在相對較短的時間內不可能完全掌握所學的知識并加以應用，這些都是客觀情況，可是不少老師和家長，往往硬是給他們和優等生提出相同的要求，要求他們和優等生在相同的時間內要消化和吸收相同的知識，把他們在短時間內的成績和優等生的成績進行對比分析，這無疑脫離了這些學生的實際，無形中加大這些學生的心理承受能力，其結果是成績不但沒有提高，反而使他們害怕老師、害怕家長、害怕學習數學，甚至有時，他們為了滿足自己的虛榮心和達到家長和老師的要求，考試時作弊，一旦發現后又要遭到他人痛斥，甚至學校處分，其結果一般只能導致心情壓抑，產生自卑心理，從而缺乏自信，最終選擇自暴自棄、放棄數學的學習、甚至學業。
2高中數學學困生的轉化建議
2.1讓學困生體驗成功，激發他們學習數學的興趣。成功是一種精神享受，更是激勵人上進的助推劑，優等生需要成功，學困生更需要成功。高中數學教學中，作為教師應盡可能地為學困生提供更多的成功的機會，讓學困生體驗成功，體驗成功的，例如教師備課時，要設計優等生回答的難問題，也要設計學困生回答的容易問題，使優等生有所收獲，也要使學困生體會到成功和進步，若有些學困生還是把問題答錯了，這是應加以引導，引導其糾正錯誤，切不可大加指責、批評，這樣會逐步使學困生嘗試到成功的甜頭；還比如，在平時的考試中出題時應出些盡量簡單些的數學題目，讓學困生也能在考試中獲得較高的成績，以培養學習數學的興趣，使他們意識到自己行，自己也能學好數學；考試結束后，教師應仔細分析學困生的試卷，不但要找錯誤所在，還要找答題時的閃光點，對簡單的錯題應要求他們要及時糾正，有些錯題還得教師輔導，對閃光點有時還應贊揚，這樣做的目的是，使學困生通過刻苦學習也有獲得高分的機會，讓他們有成就感，逐步改變他們的數學學習成績真是比別人差一等的局面和印象，從而提高他們學習數學的興趣和自信心，激勵他們更加努力，以此達到徹底轉化他們的目的。
2.2讓學困生得法，提高他們的學習學效率。學困生的成因是多方面的，其中沒有科學的學習方法也是一個主要原因。作為教師應根據不同的學困生的實際情況，對他們分別進行學法指導，指導學困生課前如何預習、課堂上如何聽講、如何思考、課后如何完成作業、如何復習等。
2.3保持自己較高的道德修養和提高自身業務水平，讓學困生欽佩你、喜歡數學、喜歡數學學習?！安鸥邽閹?、身正為范”，作為一名教師，不但要有高尚的道德修養，而且還需要較高的才學水平，只有這樣，學困生才能從內心深處尊重自己，喜歡自己所教的科目，從而為學生學好自己所教的科目打下比較堅實的興趣基礎。正因為如此，作為教師，我們應不斷鉆研自己的業務，應不斷提高自己的教學水平，應不斷保持為人師表的良好形象，為學生起表率作用。
綜上所述，是本人長期從教以來，對高中數學學困生的成因及如何轉化的幾點看法。當然，數學學困生的轉化是有難度的，更不是紙上談兵，我們轉化高中數學學困生需要堅持、也還需要耐心，筆者終究相信“一分耕耘、一分收獲”。
參考文獻
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記憶是思維之鑰的儲倉，沒有記憶，思維就是斷層的，記憶是智慧的母親，沒有記憶，學習就是失敗的.化學知識點的繁多讓許多原本喜愛化學的高中學生望而卻步，甚至在高三幾輪復習中，因為基礎知識、基本規律的記憶的偏差和缺失而導致解題正確率、速率停滯不前，得分不高從而沮喪抑郁，對其他學科的復習產生消極影響.但如果學生可以掌握一些巧妙的記憶方法，將化學知識清晰地存儲于腦海中，隨時隨地快捷地提取，壓力山大的高中生涯將會輕松一點，勝人一籌.
常見可應用于高中化學知識體系中的記憶術有：
一、關鍵詞記憶法
關鍵詞是透過現象看本質的鑰匙，是對廣泛的文字信息的綜攝.通過對關鍵詞的分析，將已有的具體信息進行重新構思，產生更多的新的構思，由此發現和掌握問題的實質.一些枯燥的化學理論、規律同一幅幅由關鍵詞串起的畫面聯系起來是記住它們的好辦法.首先，要能夠回憶起理論、規律中的關鍵詞，其次要記住這些理論、規律的適用范圍，全面考慮有無特例.
比如，電離能和電負性周期性變化的規律：同一周期，從左到右，第一電離能呈變大的趨勢，但價電子為ns2和ns2np1的元素相比較，由于第ⅢA族的元素原子p軌道上有1個成單電子，不穩定，比第ⅡA族的相鄰元素更容易失去一個電子，故同周期ⅡA族的元素的第一電離能大于ⅢA族的元素第一電離能.與此類似的還有第ⅤA、ⅥA族的元素，第ⅤA的元素p軌道處于半充滿狀態（ns2np3），屬于穩定結構，第一電離能數值大于相鄰的第ⅥA族的元素；而電負性，描述的是不同元素的原子對鍵合電子的吸引力的大小，同一周期，從左到右，電負性逐漸變大.該規律圈出關鍵詞后可簡化為“三字經”言：電離能，看充滿，左到右，趨變大，有特例，或二三，或五六；電負性，比引力，左到右，漸變大.
利用關鍵詞進行記憶不僅能夠加深對化學知識的理解，還能夠將這種提取關鍵詞的能力應用在對化學問題的具體分析過程中，同時提高自身解決問題的能力.
二、聯想記憶法
聯想指由于某人或某事物而想起其他相關的人或事物，是將你想要記住的東西和已知的東西之間形成智力聯系的過程，它能夠幫助我們在具有某種共性或者共同點的人、物體、圖像等之間建立聯系.在高中化學知識體系中，我們習慣于將化學物質聯想為枝繁葉茂的大樹，每一次分類就是每一處由小到大、由表及里、由現象到本質的系統構造；我們將紛繁復雜的化學反應聯想為形態各異的大廈建造，每一種生成物的出現都是微粒樣磚瓦的重塑，演繹著決定和被決定的因果邏輯.對于抽象的化學基本概念的記憶，此法較為有用.
例如，記憶氧化還原反應中關于還原劑和氧化劑的概念，到底還原劑失電子化合價升高，還是氧化劑失電子化合價升高，常有學生混淆，此時介紹聯想記憶法，會使概念清晰化，易于辨析.我們嘗試將氧化還原的過程聯想成一次好朋友之間贈與和接受電子的過程，初中熟悉的氧化劑是氧氣，那么我們就將氧化劑聯想成氧氣，氧氣的化合價為零，只能降低成負價，這是氧氣接受了別的物質的電子造成的，下次它就要將電子再“還給”其它物質，所以生成物叫“還原產物”，這一過程氧氣被還原，發生還原反應，而還原劑作為贈予電子的那一方，也就是把電子還出的那一方，化合價因為電子的離開而升高，下次它就輪到“像氧氣那樣接受電子”，所以產物叫“氧化產物”，這個[JP3]給出電子的過程就是還原劑被氧化的過程，還原劑發生氧化反應.[JP]
三、路線記憶法
路線記憶法是將聯系、位置和想象結合在一起的一種強大、完整的記憶技巧.首先選擇一個比較熟悉的地點，比如你的家、學校、或者公園，用這個地點構思一小段旅行的路線，包含你最為印象深刻的地方，比作站點，每次運用這條線路時只要清空原有路線上的站點的內容，重新儲存要記住的新信息；然后按照記憶內容的順序安排站點的順序，用這些站點儲存要記住的東西，站點的選擇最好與記憶的內容有關；接著是記憶這條線路，一邊閉上眼睛想象自己在旅行，沿途是自己熟悉的風景事物，一邊數著每個經過的站點，直至終點站；最后是記憶內容，可以配合使用許多手段，比如夸張、色彩、動作、味道等等.
熟練掌握氧化還原反應中離子得失能力順序是我們熟練解決氧化還原相關題目的依仗，陽離子得電子順序與金屬活動性順序相反，比較容易記憶和使用，但是陰離子等的失電子順序（S2->I->Fe2+>Br->Cl->OH-）較難記憶，我們可以嘗試使用位置記憶術.假設我們學生高中學習期間常往來的地點有宿舍、食堂、操場、教室，高中學習壓力大，大多數學生缺乏睡眠，希望留（硫S2-）在宿舍，更聰明一點得去食堂補碘（I-）這個智慧元素，途經操場大門上欄桿上都可以看到鐵（Fe2+）銹（溴Br-）斑斑，綠（氯Cl-）草茵茵的操場.
四、諧音記憶法
利用漢字中同音或近音的條件，用同音或近音的字來代替本字，產生辭趣.輕松詼諧地句子、故事總使人心情愉悅，短時間里加強有意注意，大小之余，印象深刻.高中生正處于好奇心旺盛的時期，對有趣的事物充滿求知欲，并且勇于模仿和超越.合理利用諧音記憶，不僅可激發學生學習化學知識的熱情，同時可以在其他學科的學習中、在今后的學習中，融會貫通，繼承和發揚祖國文化瑰寶.
高一上學期期末考試已經結束了，高一年級學生就要面臨高二的文理分科。高一寒假學習計劃對自身做個清晰、理性的分析，確定自身優勢，為學文、學理尋找理由就顯得頗為重要。大概方向確定后，就要明確自己所選擇的方向中，哪些學科要參加高考，哪些只需通過會考，從現在起就可以相應地制定出針對不同科目的不同 “用力”方法，將自己高中的時間、精力做到合理分配。
依常規來看，多數學生會選擇學理——未來的升學、就業面相對更寬。學習理科，數、理、化就全部是考試科目，而數理化的難點都在高一。因此，高一寒假必須做的就是把上學期沒有學會的內容學明白。有一些知識的掌握是為了以后更好應對相關知識點，如果高一就出現漏洞，未來所有相關知識也都會關聯出現問題。
值得注意的是，高一的學習量很重，很多學生往往在第一學期還不太會調控。因此，高一學生第一學期的功課或多或少都會有落下的地方，這就需要利用寒假進行調整、提高、填補工作，甚至可以說，寒假能否利用好，對未來三年的狀態會產生重要的影響。
高一寒假學習計劃時間安排：
7：00 起床
7：20 洗涑完畢之后跑步：繞樓2樓(7：20----8：00)
8：05 吃飯
8：20---8：50 背單詞
8：55---9：25 背課文
9：35---10：35 數學
10：45---11：45 英語
11：45---12：00 課外書
12：00---13：00 午休
13：10---14：10 化學
14：20---15：10 物理
15：20—16：20 語文
16：20---吃晚飯前 free
關鍵詞：多媒體技術；高職高專醫用化學；應用分析
引言
本著高職高中專醫用化學的教學質量提高的目的,在多數實體課堂引入多媒體技術顯得尤為重要,而類似Flash這樣的傳統計算機多媒體技術的應用更為醫用化學的課堂教學增色不少。
1 醫用化學的教學特點及現狀
傳統的醫用教育化學的課程一般課程設置為一學年，而從授課形式以及授課效果來看普遍學生的課堂積極性較差，大部分源于課堂教學形式呆板，學生只能靠死記硬背等形式來記住一些傳統的知識點，這樣無疑給教學質量大打折扣。另外醫用教學的內容更新又十分迅猛，教師假如不能做到與時俱進，那無疑就會對給課堂的教學帶來諸多不便。諸如此類的現狀是制約目前醫用化學發展的關鍵所在，因此引入多媒體技術來豐富完善課堂教學顯得尤為重要。
1.1 醫用化學的教學特點
由于醫用化學的教學中往往需要大量的教學資源來輔助授課，因此像標本、掛圖以及錄像等傳統的輔助手段缺一不可。但是由于實體教學的局限性，學生無法在第一時間了解到最直觀的知識點，所以傳統醫用化學的教學特點就是分散性與非直觀性，其次就是大面積的重復知識點需要大量的PPT演示來將平面的知識點生動化與立體化，但是往往在沒有多媒體教學的引入之前，傳統的教學太過于單一化與平面化，這樣學生往往只能被動式的接收信息，所以醫用化學的傳統教學特點第二就是單一化與機械化。
1.2 醫用傳統教學的局限性
醫用傳統教學的最大局限性與缺陷在于以下三個方面：一、教學內容單一，由于以單一的醫學化學如一些藥物化學反應式、酶連反應還有人體結構示意圖等比較枯燥的內容只是以掛圖或者黑板抄的形式來展示，無非是單一而且枯燥。其次第二點是教學手段單一，雖然課堂的標準化程度得到了一定程度的提高，但是課堂的知識傳授依然以教授傳授為主，而且多數停留在信息的單向傳輸階段。第三點是教學質量并不穩定。由于傳統的醫用教學知識點眾多，盡管有了相應的掛圖以及人工標記的指示，但是教學效果仍然高度依賴教師質量，從而導致教學品質無法穩定的進行下去。
2 多媒體技術在教學中的實踐與分析
由于醫學課程相對來說比較枯燥且死板，學生的學習興趣一時難以激發。而假如將多媒體技術應用于醫學教學中，會對教學結構與體系乃至教學思想的改革都起到了促進和推動的作用。
2.1 多媒體技術引入的利與弊
首先，多媒體技術能夠極大的增強學生的學習動力，首先其立體的功能可以展現一些化學物質的宏觀和微觀結構。并且當一些學校并不具備完善的實驗條件時，應用多媒體技術來演示化學反應進程可以使學生感到生動、形象有趣，可以提高學生的記憶力合學習能力。還有一點就是多媒體技術能夠提高學生的自學能力和動手能力。因為傳統的教學任務主要是向學生灌輸知識，這樣往往不利于學生終身學習的需求。而通過應用多媒體技術的交互租用則可使學生與計算機進行信息交流對話，大大增強了學生掌握知識與技能的能力，并且培養了學生觀察能力以及縝密的思考能力。但是凡事都存在這對立面，而多媒體的引入同樣也會給醫用教學帶來弊端。比如對于病理學這門課程考試而言，多媒體技術的引入就存在這以下方面的不足。首先內容的真實性尚有欠缺，由于制作幻燈片進行考試的畫面都是平面圖像，這樣的層次感比較差不如事物來得真實。
2.2 拓寬多媒體應用渠道的必要性
由于社會發展以及教育改革的必要性，傳統的教學以及無法適應如今的課堂教學，因此在醫用化學教學中引入多媒體渠道是教育改革的趨勢與要求。而且，從近幾年來看，一些教研人員也在深化課堂教學改革以及優化教學結構上做出了很多有益的探索，并且總結了大量值得推廣的經驗。這是拓寬多媒體應用渠道的必要性一。還有另外的一個必要性是教改革上的要求。因為教師需要吸收大量豐富的材料來展示給學生，而多媒體技術就可以提供這樣的平臺，從而可以達到預期的效果，并且也能把精心選擇的材料傳遞給學生，從而增強課堂教學的實效性。
3 開發多媒體醫用化學教學軟件的重要性
3.1 Flas軟件圖片的重要性
由于醫用化學中的化學符號眾多包括大量的化學結構式以及化學實驗中用到的各種儀器比如燒杯到分析天平再到高效液相色譜，分光光度計等。而傳統的教學根本無法將這些學習內容很形象地展示給學生。假如通過在PPT或者一些幻燈片上引入Flas軟件，并且能夠通過數碼相機將實驗所記錄的真實圖片采集下來，并通過技術處理后導入多媒體教學軟件中。
3.2 ChemOffice在醫用有機化學教學中的重要性
因為醫用化學的教學涉及到很多后續的課程包括生物化學、藥理學還有醫用生物學、臨床醫學等多方面，為了使學生能在有限的課堂時間內汲取更多的基礎理論知識，多媒體技術的應用顯得尤為必要。而隨著計算機技術的發展與深入，假如能開發多種化學軟件，并將其與多媒體技術有機的結合為一體，那將進一步地提高整個課程的教學質量和教學效果。例如劍橋軟件公司開發的一款軟件ChemOffice就是基礎地介紹了醫用有機化學的基礎的一面，其功能如下：（1）、可以顯示有機化合物的三維立體結構，便于學生從空間上理解復雜的有機分子結構，在有機化學的教學中，往往糖類的分子結構讓大多數學生挺頭疼的，例如糖的開鏈結構是如何轉變成哈沃斯結構的，該軟件就清晰地展示了比如a-葡萄糖的三維立體結構，便于學生理解單糖是如何從開鏈結構轉變為環狀結構。（2）、可以計算分子的電荷分布，在學習苯環的取代基的定位效應時候，比如當取代基為鹵素的時候，為鄰對位效應，但又是鈍化集團，教材上的一些一些理論可能不太明確，但是假如借助ChemOffice 軟件分子的電荷分布來說明，通過該軟件的精確計算，假如苯環上的電子云密度降低，說明鹵素為鈍化基團；同時鄰位與對位的電子云密度相對比較高，說明鹵素有較高的鄰、對位效應。
3.3 多媒體教學中加入動畫軟件的重要性
類似于Photoshop這樣的動畫編程軟件在醫用化學的教學中顯得必不可少哦，因為其通常可以將對象的大小、顏色以及構型進行相應的彩編，然后有助于幫助學生理解課堂教學中的一些抽象化的化學問題，并且當講解物質結構時候，關于原子的電子層以及能級等比較抽象的問題時候，假如能夠制作成多媒體動畫形式并加以演示，那無疑會加深了學生對整個系統的理解。
4 結語
多媒體技術在高職高專醫用化學教學中的應用具有深遠的意義，首先有助于教師隨時收集教學反饋信息，以及學生發現自己學習的不足，并且更重要的是也能有助于學生理解相應的化學軟件教程，達到計算機軟件與多媒體技術有機的結合為一體。（雅安職業技術學院醫學系；四川；雅安；625000）
參考文獻：
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關鍵詞： 信息技術；化學；實驗；情境；直觀性；互動
目前，以現代教育理論和方法為基礎，以系統論的觀點為指導，以信息技術為核心的現代教育技術的運用，已成為我國面向21世紀基礎教育教學改革的新視點，信息技術與課堂教學有機統一的研究也因此成為教學科研的重點。在建構主義理論指導下，信息技術為高中化學教學提供了良好的學習環境，使學生的主體地位得以真正確立，使自主學習、探索學習、協作學習得以真正實現，使終身教育和學習社會化成為可能，極大地激發了學生的學習動機，培養了創新精神和實踐能力。信息技術與高中化學課程的整合不能停留在工具層面上，應深入探究教學設計、教學策略，以形成教學模式，應結合教學理論和實踐，以推進化學教學的徹底變革。
一、利用信息技術有利于優化實驗教學
以實驗為基礎是化學學科的重要特征之一。教師的演示實驗和學生的分組實驗在教學中扮演相當重要的角色。遺憾的是在實際教學中，很多實驗不能現場操作。這樣不但會使某些教學內容抽象、枯燥、說服力不強，而且還造成學生難以理解，達不到較好的課堂效果。此時，如果恰當地將信息技術運用到課堂教學之中，會彌補這一缺憾，收到意想不到的效果，從而順利實現教學目的。如，在教學中如果遇到帶有危險性的實驗，污染嚴重的實驗和現象不太明顯的實驗，我們可以充分利用教材中的插圖、圖解、文字等內容，用計算機將其進行重新編輯，同時加入動畫和聲音。這樣，學生的興趣就可以大大提高了。又如，在講化學實驗中的一些錯誤操作時，如果只靠老師講其錯誤的原因以及可能帶來的危害，常常會使學生半信半疑。這時我用計算機模擬這些錯誤操作并通過放慢動作將其步驟分解。例如，稀釋濃硫酸時將水倒入濃硫酸中，液體沸騰飛濺；給固體加熱制備氣體時，試管口向上傾斜，加熱產生的水倒流至試管底部造成試管破裂；當加熱液體超過三分之一的試管且試管口朝著人時，液體沖出管外且灼傷人等都可用動畫來完成。學生看到錯誤操作的危害性，印象深刻并加深了對錯誤原因的理解。在這樣的課堂上，學生興趣十足，自然愿意參與進來，從而成為課堂的主人。
二、利用信息技術有利于創設問題情境
信息技術能夠向學生提供多種信息處理能力和多種刺激的信息，如語言、文字、圖像、動畫、聲音等。學生可以通過多種感官獲取豐富的信息，有利于學生的記憶力和想象力的提高，對學生的吸引力也很大。因此，信息技術具有其它教學手段所不可比擬的優勢。如，化學某些科普性的視頻，某些化工生產流程、環境污染的介紹、各種礦產資源、海洋資源的介紹的視頻。通過這些視頻的展示既可以使化學教學理論聯系實際生產、開拓學生視野，又可以增加學生學習化學的興趣。例如，在“化學平衡”這節課時，我采用三維動畫模擬制作氮分子、氫分子、氨分子達平衡的動畫過程，通過畫面動靜結合的形式，直觀形象地分析了化學平衡的動、定、變三大特征，通過使學生看到化學鍵的斷裂和重新組合的過程使較為抽象的概念容易讓學生理解，便于記憶。總之，信息技術形象生動，感染力強，能激發學生對學習的興趣，從而活躍課堂氣氛，使學生在興趣盎然的情境下去接受知識，興高采烈地參與課堂，鞏固了知識。
三、利用信息技術有利于化學直觀性教學
化學是研究物質的組成、結構、性質以及變化規律的基礎自然科學。利用信息技術對實驗現象進行放大，可以克服演示實驗可見度小的缺陷，使學生能清楚地觀察到實驗現象。如《鐵的性質》一節 Mg、Zn、Fe、Cu 與 HCl 是否反應及反應速度的對比實驗，在實驗時將儀器放在實物展示臺上，用液晶投影機投影到大屏幕上，根據是否產生氣泡、反應的劇烈程度等現象，推斷金屬的活動性順序，這樣做把俯視觀察變為平視觀察，讓坐在后面的學生對實驗中產生的細微現象仍然看得非常清晰，增強了實驗的可視性及真實可信性。教師充分利用投影手段克服實驗器材的局限，輔助教學，引導學生仔細觀察、感知，自覺地進行表象活動，提高演示效果。又如，在探究電解一些電解質溶液的電解產物及溶液的 PH 值變化時，我利用 flash 軟件設計了一個課件，用一些小球來模擬溶液中看不見的陰陽離子，然后讓學生分別對電解氯化鈉溶液，氫氧化鈉溶液，硫酸銅溶液和硫酸溶液進行模擬分析過程，探究出電源的陰極和陽極產物的規律和溶液的 PH 值變化規律。通過這種方法，使學生對理論知識的學習不再覺得困難，相反卻產生了很大的興趣，非常愿意去嘗試學習。真的是變被動為主動了。
四、利用信息技術有利于實現互動性教學
【關鍵詞】 nf-κb；核糖核酸類，反義；肌細胞，平滑肌
effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells in spontaneously hypertensive rats/hu rong，hong huashan，xu changsheng，wu kegui//chinese journal of cardiovascular rehabilitation medicine,2009,18(2):116
abstract：objective:to investigate the effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells（vsmcs） in spontaneously hypertensive rats（shr） promoted by thrombin.methods:after pretreated with the 50moi recombinant adenovirus expressing antisense rna of nf-κb for 48h and 100μmol/l pdtc （nf-κb special inhibitor）for 1h， vsmcs proliferation induced by 0.5u/ml thrombin was investigated.the proliferation rate of vsmcs was determined with both wst-1 metabolic activity and 3h-tdr incorporation efficiency.results:the pretreatment of recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna obviously inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin (p<0.01) at the rate of >30%, which was similar to the inhibition of vsmcs proliferation by nf- κ b special inhibitor pdtc with no statistical difference between two group(p>0.05).conclusion:the recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna may effectively inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin,is similar to the nf- κb special inhibitor,may be applied to successive basic research and clinical interference treatment.
author′s address：department of cardiology，union hospital，fujian medical university，fuzhou，fujian，350001,china
key words：nf-kappa b;ribonueleases,antisense; myocytes,smooth muscle
血管平滑肌細胞（vsmcs）的增殖、向內膜下遷移、分泌細胞外基質等在血管增殖性疾病的發病中起重要作用。體內可以引起細胞增殖的因素很多，各種有絲分裂原可通過不同的信號傳導系統產生細胞增殖反應，單純抑制某種特定的因子并不能完全抑制病灶形成。因此，阻斷調節細胞增殖、分化、遷移等最終共同通路的關鍵基因成為有效防止血管增殖性疾病的研究方向。核因子-κb（nf-κb）是調節細胞基因轉錄的關鍵因子之一，調控幾十種生長因子、細胞因子、粘附因子、趨化因子等靶基因的表達[1]。因此，許多學者認為調控nf-κb的活性是一個理想的治療靶點?；蛑委熓菑幕蛩礁淖兗毎牟±頎顟B而達到治愈疾病的目的，具有一次治療長期有效的優點，克服現有藥物療法的缺點，實現“生理性治療”[2]。反義rna是一類能與特異性mrna互補的小分子質量的、可擴散的dna轉錄物，它能夠從翻譯水平、轉錄水平和核酸復制水平上高度特異性地抑制靶基因表達。反義核酸技術的意義在于僅干擾靶基因功能，對基因組其它基因的結構無影響，而且方法簡便。本研究試圖在細胞水平探討以腺病毒為載體，nf-κb反義核酸治療對vsmc增殖的影響，為其在整體動物的水平治療經皮冠狀動脈介入治療（pci）術后再狹窄和動脈粥樣硬化（as）奠定基礎。
1 資料與方法
1.1 一般資料
實驗所用的自發性高血壓大鼠（shr）購自北京維通利華有限公司［二級動物合格證號：scxk(京)2003-0003］。表達nf-κb反義rna重組腺病毒載體－pad/cmv/269和空載體pad/cmv系本實驗室構建保存[3]；凝血酶、吡咯烷二硫氨基甲酸鹽（pdtc）（sigma公司）1；氚-胸腺嘧啶核苷（3h-tdr，中國原子能科學研究院）；測定細胞活性的wst-1試劑盒（德國boehringer mannheim公司）；陽離子脂質體（lipofectamine）tm 2000轉染試劑（invitrogen公司）。
1.2 實驗方法
1.2.1 vsmcs的培養與鑒定[4]:以組織貼塊法培養vsmcs。取清潔級三月齡雄性shr大鼠，無菌操作分離其胸主動脈，剪碎后加入含15%胎牛血清（fbs）的dmem培養液（含100 ku/l青霉素，100mg/l鏈霉素），5%co2、37℃二氧化碳培養箱靜置培養。實驗選用3～5代細胞。用光鏡和免疫細胞化學法鑒定。
1.2.2 重組腺病毒的制備、滴度測定及鑒定[3]:paci酶切使重組腺病毒質粒pad/cmv/269線性化，紫外分光光度計測定質粒的純度及濃度。按lipofectaminetm 2000轉染試劑盒操作說明，用脂質法轉染培養好的293單層細胞，進行細胞內包裝，形成并釋放完整的腺病毒顆粒。包裝后的腺病毒用空斑法測定滴度，操作按virapowertm adenoviral expression system 試劑盒說明書。重組腺病毒用聚合酶鏈式反應（pcr）方法進行驗證，按dna提取試劑盒操作說明。
1.2.3 實驗分組:實驗選用3-5代的培養vsmcs，用0.125％胰酶消化后，以2×104個/孔或5×103個/孔，均勻接種于24孔或96孔培養板上，待細胞貼壁生長至70%～80％匯合時，吸棄原培養液，換用無血清或0.2％血清的dmem培養液，繼續培養24h，使vsmcs處于g0/g1期，再進行后續干預實驗。將培養細胞分為5組：①空白對照組：加入無血清dmem液；②空載體組：加入50多重感染（moi） ad/cmv感染vsmcs；③凝血酶組：加入終濃度為0.5u/ml凝血酶；④pdtc組：先加入終濃度為100μmol/l的pdtc預處理1h，再加入終濃度為0.5u/ml凝血酶；⑤反義rna預處理組：先加入50moi 重組ad/cmv/269感染vsmcs后48h，再加入終濃度為0.5u/ml凝血酶。按實驗要求細胞繼續培養至加刺激因素凝血酶后24h，測定細胞增殖率。每組復3孔取均值。重復4次。
1.2.4 vsmcs增殖的測定方法:wst-1代謝活性測定[4]：取3～5代vsmcs以5×103個/孔均勻接種于96孔培養板上，培養至70%～80％匯合時，換用0.2％血清的dmem培養液，繼續培養24h，使vsmcs處于g0/g1期。在上述各干預因素刺激至規定時間后加入即用型wst-1溶液，10μl/孔，繼續置37℃ 5％co2培養箱孵育90 min。取出培養板，置振蕩器上充分振蕩（300 r/min）1min，在酶標儀450/630nm雙波長處檢測光密度（od）值，即wst-1檢測值。每次實驗均設一個（復3孔）空白對照孔（以dmem培養液代替細胞），對照孔吸光值應<0.01。dna合成率測定：3～5代vsmcs以2×104個/孔，均勻接種于24孔培養板上，在上述干預因素加入時，同時加入1微居里/ml的3h-tdr，共育至相應時間后，吸棄培養液，0.125％胰酶消化細胞，收集細胞于0.45μm的微孔濾膜（預先用10％三氯醋酸濕潤）上，負壓抽濾，用生理鹽水和10％三氯醋酸沖洗濾膜，室溫涼干后置入液體閃爍杯中，加入3ml閃爍液［二甲苯+0.5%二苯基噁唑（ppo）+0.04%對苯撐苯唑基（popop）］，靜置過夜后，在液體閃爍計數器上進行放射性強度的測定。
1.3 統計學處理
實驗結果用數據和圖表表示，測定值以均數±標準差(±s)。采用spss 10.0統計軟件包分析。組間比較采用多樣本均數的單因素方差分析檢驗。p<0.05為差異有顯著性。
2 結 果
2.1 nf-κb反義rna重組腺病毒感染vsmcs對vsmc wst-1代謝活性的影響
凝血酶＋反義rna組和凝血酶＋pdtc組的wst-1的od值均比凝血酶組明顯減少（p<0.01），反義rna組與pdtc組之間不存在顯著差異（p>0.05）。50moi nf-κb反義rna和100μmol/l pdtc對0.5u/ml凝血酶誘導的vsmc wst-1代謝活性增加的抑制率分別為35.64％和36.32％，較之凝血酶組顯著減少（p<0.01），見表1，圖1。
2.2 nf-κb反義rna重組腺病毒感染vsmcs對vsmc 3h-tdr摻入率的影響
凝血酶＋反義rna組和凝血酶＋pdtc組的3h-tdr摻入率均比凝血酶組明顯減少（p<0.01），反義rna組與dptc組之間不存在顯著差異（p>0.05）。50moi nf-κb反義rna和100μmol/l pdtc對0.5u/ml凝血酶誘導vsmc 3h-tdr摻入率增加的抑制率分別為45.22％和49.62％，較之凝血酶組顯著減少（p<0.01），見表1，圖2。表1 不同組wst-1測定的代謝活性和氚胸腺嘧啶核苷（3h-tdr）摻入率(n=4)
3 討 論
許多能夠抑制vsmc增殖的藥物，無論是在基礎研究還是臨床實驗中，均已被證明具有防治動脈硬化及pci術后再狹窄的作用。但由于藥物治療的效果尚不十分理想，以及必須堅持長期用藥給病人心理上造成了巨大的困擾，尋找更加有效和方便可靠的治療方法便成為心血管病研究的熱點。盡管基因治療目前尚不十分成熟，但在這一領域中所取得的成就已引起眾多學者的關注。
凝血酶是一種重要的血管活性物質，除凝血作用外，晚近也證明它還能促進vsmc的增殖和遷移；促進血管壁非細胞成分的累積和新生內膜形成和釋放炎癥反應因子等作用，其功能多由細胞表面的凝血酶受體基因介導[5]。nf-κb是調節細胞基因轉錄的關鍵因子之一，新近研究發現vsmc中存在著nf-κb通路，且是vsmc增殖必經的激活通路。本系列實驗的先前研究結果顯示凝血酶能夠激活vsmc的nf-κb，使其從細胞漿轉位至細胞核，而且凝血酶引起的vsmc增殖與nf-κb途徑相關聯[6]。nf-κb可能是vsmc增殖的細胞內信號轉導的共同通路。國內、外已有利用反義核酸技術抑制凝血酶受體表達來阻斷凝血酶作用，從而抑制vsmc增殖的報道[7～9]，但利用反義表達載體、反義核酸技術抑制nf-κb的生成，從而達到抑制凝血酶誘導vsmc增殖的目的至今尚未見相關報道。
本研究利用前文[3]構建的nf-κb反義rna腺病毒表達載體，轉染293細胞，獲得高滴度腺病毒上清，再感染vsmc，觀察nf-κb反義rna對凝血酶引起的細胞增殖的作用。結果顯示，該載體能在vsmc內表達出nf-κb反義rna，顯著抑制了凝血酶誘導的vsmc增殖，顯示出該反義表達載體在心血管細胞增殖性疾病的基因治療的研究中具有良好的適用性。
基因治療是從根本上針對發病環節的一種治療手段，靶向性更明顯，具有一次治療長期有效的優點。本實驗結果證實，在同等條件下，nf-κb反義rna對vsmc增殖的抑制率＞30％，即具有生物學效應，且與nf-κb特異性阻斷劑pdtc的抑制作用相仿，為今后進一步的基礎研究和臨床干預治療奠定了基礎。值得注意的是，nf-κb在維持機體的防御功能和細胞生死平衡方面，起著極其重要的作用，完全地、持續地阻斷nf-κb激活有可能導致免疫缺陷和正常細胞的凋亡[10,11]。因此，如何進一步提高反義核酸技術的穩定性、有效性、安全性，尚待進一步的研究。
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[論文摘要]文章基于高職藝術設計類人才培養特點，以南寧職業技術學院“企業+責任班”模式構建與實踐為例，探討了在產業經濟轉移背景下，實現高職藝術設計類人才規模化培養工學結合模式。
[論文關鍵詞]高職藝術設計 規?；∪瞬排囵B 工學結合 企業+責任班
一、問題的提出
近幾年，沿海一線城市營運成本大幅增加，一批企業從沿海遷往內地，產業轉移趨勢已形成。內地的裝飾與環境景觀設計、新媒體設計、藝術設計類等技術服務產業，受到產業轉移影響，迎來了新的機遇與挑戰：(1)隨著產業轉移，內地藝術設計類等技術服務市場活躍；(2)外地企業帶來先進專業技術、規范的管理理念，促使內地市場專業細分明顯、市場競爭加??；(3)基于藝術設計類技術服務特點，外地企業需要大量本地技能人才；同時，本地企業受產業轉移沖擊，對人才規格要求發生變化。
就目前我國就業形勢來看，高等職業人才培養規?；咽谴髣菟叀６鴤鹘y藝術設計類專業人才多是小班培養，辦學規模與質量的矛盾一直是困擾高職院校的瓶頸。如何乘產業轉移東風，整合校企資源，探索一條具有專業和地方特色工學結合路子，實現高職藝術設計類人才規?；A麗轉身，是擺在高職教育者面前迫在眉睫的問題。本文擬以南寧職業技術學院藝術設計類人才培養建設為例，探討全方位工學結合的高職藝術設計類規模化人才培養模式研究與實踐，與相關人士商榷。
二、國內外高職人才培養工學結合模式研究與實踐對比分析
1 基于工學結合的人才培養模式研究與實踐是目前高職教育的重點、難點。目前，進一步深化高職教育改革，加強工學結合、校企合作是高職教育的關鍵點。在高職中，工學結合人才培養模式主要有以下幾種：(1)“訂單培養”或“訂單教育”。其基本內涵是由用人單位提出人才需求標準，校企雙方共同論證確定培養目標、課程設置、教學計劃、教學大綱和教學進度，完成人才培養的任務。例如“豐田班”“富士通”班等培養形式。(2)階段性“工學結合”培養模式。其基本內涵是學生在課堂學習基本專業知識理論，然后通過課程實訓、頂崗實訓，學生走出校園，進入職業崗位實訓。當前高職中文、管理等各類專業廣泛應用該培養模式，例如“2+1”“2.5+0.5”等培養形式。
其中，“訂單”式合作培養，學校基本照搬企業培訓計劃，企業將培訓中心移植到學校，校企共建，工學結合融合性較好。基于職業崗位特性，當前應用于汽車維修、機電一體化等勞動密集型、機械生產流線化的職業崗位人才培養，不具有普遍適用性；階段性“工學結合”培養模式，職業崗位應用面向廣泛，但該模式中，校內外教師、工和學相對脫離，校內教師對市場前沿信息把握有相當難度，理論和實訓的融合性不高。
2 國內外工學結合人才培養模式研究與實踐對比分析。發達國家職業教育中人才培養模式有以職業技能培訓為主體的模式，例如德國的“雙元制”、澳大利亞的“新學徒制”、法國“學徒培訓中心”；還有以職業素質培養為主體的模式，例如新加坡的“教學工廠”、日本的“企業教育”、丹麥的“模擬公司”等。
與發達國家相比，我國高職教育人才培養存在以下不足：(1)我國工學結合人才培養模式支持系統的要素短缺——缺少管理體制、人員結構、教學制度、課程體系等方面的支撐；(2)政府缺乏對企業的激勵機制，用人單位合作的積極性不高成為模式實施的一大障礙；(3)政府沒有鼓勵學校實施工學結合人才培養模式的專項經費。因此，我國學校實施工學結合人才培養模式往往處于完成任務和勉為其難的被動地位。
三、高職藝術設計類規?；瞬排囵B工學結合模式探討
1 基于工學結合的高職藝術設計類規?；瞬排囵B需要解決的關鍵問題。結合上節分析，在我國現有國情下，高職藝術設計類規?；瞬排囵B需要解決以下問題：(1)校企合作、工學結合方面，需要整合利用產業轉移資源，尋找校企合作最佳點，服務地方經濟；(2)校方辦學方面，需要突破藝術設計類專業小班培養定式，解決辦學規模、辦學實訓和師資基礎條件與教學質量之間的矛盾。
2 “企業+責任班”人才培養工學結合模式構建。第一，“企業+責任班”人才培養工學結合模式基本思路。學校設立由行業專家、專業帶頭人等組成的專業建設指導委員會，并由專業建設指導委員會選擇生產技術先進、管理嚴格、經營規范、社會聲譽好，尤其在某一方面的專業技術具有專業核心競爭力的企業合作，根據企業需要技能人才的特點，找準雙方利益共同點，成立教學責任班。責任班以合作企業的特長專業技術為職業技能的培養重點，以企業實際項目為依托建立合作工作室，由責任班專業教師組織，企業骨干和專家共同建立課程體系、確定課程各階段實訓環節、制定評價標準等，以實現“多方位、全過程”工學結合人才培養模式。
第二，“企業+責任班”人才培養模式構建。以南寧職業技術學院藝術工程學院為例，經過多年的高職教育發展，藝術工程學院在近年來國家示范院校建設、精品課程、教學團隊、國家名師等方面建設均取得了較好成績，由此，帶了專業品牌效應，教學改革上教改、科研、社會服務的成效凸顯，辦學形式類型多樣，藝術設計類專業招生逐年遞增。以國家精品專業室內設計技術專業為例，該專業從2008級開始增加到10個班。而辦學規模的擴大，帶來了實訓設施、師資等教學條件方面較大壓力。 轉貼于
鑒于上述情形，南寧職業技術學院室內設計技術專業教學團隊與廣州、香港及本地裝飾龍頭企業合作建立“企業+責任班”，根據各企業特質，一個企業引領一個專業拓展方向，把室內設計技術專業方向細化為設計、施工圖、家居飾品、施工等方向，共同建立課程體系、確定課程各階段實訓環節、制定課程與專業評價標準等。室內設計技術專業教學團隊與各合作企業研討確定出一個平臺、多個方向課程體系，即一年級為專業方向相通基礎平臺課程和由合作企業指導下專業方向認知實訓；二、三年級依托不同方向的“企業+責任班”載體，既可以“企業進校園”，也可以“學生出校園”。學生采取靈活多樣的學習形式，以室內設計技術專業崗位培養要求為目標，引入行業、企業崗位標準，以企業實際工程項目為依托，校企共同開發課程，構建教學課程體系?！捌髽I+責任班”，以班級為單位，引進企業管理理念與機制，對學生教學過程組織管理、教學質量監控；引進企業評估標準，建立學生培養評估體系，形成學生自主管理。
3 企業+責任班”人才培養模式分析。第一，“企業+責任班”模式實施的前提。應該說，在中國現有國情下，由于政府缺乏對企業的激勵機制，企業只是經營的實體，學校才是人才培養的主體，高職院校只有增強人才培養主體意識，主動融入企業發展的產業價值鏈中，才能尋求到校企的利益合作點。所以，“企業+責任班”模式的實施是以學校增強人才培養主體意識為前提的。
第二，“企業+責任班”模式實現全方位工學結合分析?！捌髽I+責任班”模式，根據某主體崗位專業群，優選在專業細分下具有某項核心競爭力的企業合作，企業在人才培養中主要起到職業技能和崗位能力培養作用。合作企業可以是時段性的，可以是一家或多家。這種模式中，學校是主動適應人才市場需求的主體，主動整合校企資源，依托企業引入項目，責任教師等校內教學團隊培養企業要求人才，為企業提供人才服務，校企是利益的共同體。所以，共享校企資源，解決辦學規模與辦學條件瓶頸問題，全方位工學結合提升人才培養質量是順理成章的結果。
[關鍵詞]MMP_2；MMP_9；TIMP_1；血管平滑肌細胞；增殖；遷移；阿齊沙坦
中圖分類號：R544.1文獻標識碼：A文章編號：1009_816X（2014）04_0274_04
[Abstract] Objective To investigate the effects of azilsartan on TGF_β_induced spontaneously hypertensive vascular smooth muscle cells （VSMCs） proliferation and migration. Methods Rat VSMCs were cultivated by the method of tissue explants adherence. Cells of generation 3 to 5 were used as the experimental system. The MTT test was used to measure cell proliferation and Boyden chamber assay was used to measure cell migration. Primary cultured VSMCs were treated by 10 ng/ml TGF_β and azilsartan for 24 hours. The expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1 were measured by Western blot and RT_PCR. Results The expression of MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 in rat VSMCs stimulated by TGF_β increased significantly. VSMCs migration and proliferation also increased significantly. Azilsartan significantly inhibited TGF_β induced MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 production in rat VSMCs， as well as VSMCs proliferation and migration. Conclusions Azilsartan inhibited TGF_β_induced VSMCs proliferation and migration by down_regulation the expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1.
[Key words] MMP_2； MMP_9； TIMP_1； Vascular smooth muscle cells ；Proliferation； Migration； Azilsartan
自發性高血壓是最常見的心血管疾病，以體循環動脈壓升高為主要特點。高血壓伴發的血管重構包括血管壁腔比增加、小動脈稀少及血管功能異常?；|金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）是參與降解全身各種組織細胞外基質（extracellular matrix，ECM）的蛋白酶家族，參與正常和病理條件下的組織重構，金屬蛋白酶組織抑制物（TIMP）是MMPs的特異性抑制物[1]。MMPs/TIMP的動態改變，造成選擇性的降解ECM，從而調整血管內皮細胞形態、生長和成活[2]。血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑可能是通過抑制局部腎素血管緊張素醛固酮系統（RAS）活性和緩激肽的降解來抑制或逆轉血管重構[3]。阿齊沙坦是一種血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑，多用于治療高血壓病[4]。但沙坦類藥物是否可抑制血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）中MMPs/TIMP的表達則鮮有報道。通過藥物抑制MMPs/TIMP活性，減少細胞外基質的降解，阻止血管平滑肌細胞的增殖和遷移是防治高血壓發生、發展的一個可能的切入點。本研究觀察血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑阿齊沙坦對血管平滑肌細胞中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表達的影響，探討轉化生長因子_β（TGF_β）在自發性高血壓大鼠發生、發展進程中誘導細胞外MMPs/TIMP分泌及促平滑肌細胞遷移、增殖能力，為臨床應用阿齊沙坦治療高血壓提供指導信息。
1資料和方法
1.1材料：自發性高血壓大鼠（SHR）和同一株系的正常血壓大鼠（WKY）大鼠（購自上海第二醫科大學附屬瑞金醫院高血壓研究所），雄性，7～10周齡。血壓：SHR>170mmHg（1mmHg=0.113kPa），WKY
1.2實驗分組：將大鼠斷頭處死，無菌情況下分離胸主動脈，剪碎后加入含有20%胎牛血清的DMEM培養液，用貼壁細胞培養法行原代細胞培養至細胞長成致密單層后傳代，取3～5代細胞用于實驗。在傳代過程中，細胞以5×105個/ml接種于6孔板培養板上。實驗前48h換成不含血清的DMEM，使細胞處于靜止狀態。將培養的VSMC分成6組：WKY組、SHR組；TGF_β刺激WKY組、TGF_β刺激SHR組：10ng/ml TGF_β誘導增殖；TGF_β刺激WKY組阿齊沙坦給藥組、TGF_β刺激SHR組阿齊沙坦給藥組：50μmol/ml阿齊沙坦預處理30min后，用10ng/ml TGF_β誘導增殖。各組均應用0.2%胎血清培養液培養，培養24h后收集細胞。
1.3MTT法檢測阿齊沙坦對TGF_β誘導的VSMCs細胞增殖的作用：取對數生長期細胞，以每孔3×104/孔均勻接種于96孔培養板內，按照上述分組方法將各組細胞懸液接種于96孔板上，培養24h后，結束實驗，將每孔的培養液吸出，重新加入180μl培養液，然后每孔加入濃度為5mg/ml的MTT液20μl。在37℃培養箱內繼續培養4h后，吸取培養液，每孔加入DMSO 200μl振蕩10min，用酶聯免疫檢測儀在490nm波長測定各孔A值，取每組3孔的均值。
1.4Boyden趨化小室檢測阿齊沙坦對TGF_β誘導的VSMCs細胞遷移的影響：取對數生長期的VSMCs，將培養的VSMCs分成6組觀察VSMCs遷移：WKY組、SHR組：上室中加入未經處理的VSMCs懸液，下室中加人DMEM；TGF_β刺激WKY組、TGF_β刺激SHR組：上室中加入未經處理的VSMCs懸液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml；TGF_β刺激WKY組阿齊沙坦給藥組、TGF_β刺激SHR組阿齊沙坦給藥組：上室中加入50μmol/ml阿齊沙坦孵育2h的VSMCs懸液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml。上、下室之間隔以8μm孔徑聚碳酸酯濾膜。將建立好的Boyden小室放入一容器培養24h后取出濾膜，固定、染色，在高倍鏡下（×400）隨機觀察6個視野，計數移行細胞數，取平均值。
1.5Western blot檢測蛋白表達：取對數生長期細胞，0.05%胰蛋白酶消化，PBS洗滌兩次后離心棄上清，加入含全酶抑制劑和PMSF的RIPA裂解液冰浴裂解提取總蛋白。BCA法測定樣品蛋白濃度，完成十二磺基硫酸鈉/聚丙烯酸胺凝膠電泳和蛋白轉膜操作，膜片分別與一抗（抗MMP_2多克隆抗體、抗MMP_9多克隆抗體、抗TIMP_1多克隆抗體）進行抗原抗體結合反應，再與辣根酶標記二抗反應，經適當洗滌，膜片與ECL溫浴1min，保鮮膜包裹后，經X光片曝光，顯影和定影，最后對結果進行光密度掃描分析。
1.6RNA的提取及RT_PCR檢測m_RNA表達：以Trizol提取細胞總RNA，按照試劑盒要求操作。MMP_2上游引物序列：5’_GCGACAAGAAGTATGGCTTC_3’，下游引物序列：5’_TGCCAAGGTCAATGTCAGGA_3’；MMP_9上游引物序列：5’_CGCAGACATCGTCATCCAGT_3’，下游引物序列：5’_GGATTGGCCTTGGAAGATGA_3’；TIMP_1上游引物序列：5’_CAATTCCGACCTCGTCATCA_3’，下游引物序列：5’_TCAGAGCCTTGGAGGAGCT_3’，按實驗室常規方法進行PCR擴增。用反轉錄反應液2μl作為模板，加入2μl上游及下游引物和2μl Taq酶后用PCR儀擴增。循環步驟如下：變性94℃ 1min，58℃ 1min和72℃ 1min共35個循環；末次長7min，終止反應。以β_actin為內參，依據2_ΔΔCT法計算各組細胞mRNA的相對表達量。
1.7統計學處理：以SPSS16.0統計分析軟件進行統計，計量資料用（x-±s）表達，組間比較采用t檢驗分析，P
2結果
2.1MTT法檢測TGF_β對VSMCs細胞的增殖作用：見圖1。MTT法檢測結果如圖所示：SHR和WKY組VSMCs，TGF_β刺激組細胞增殖水平均顯著高于對照組和TGF_β+阿齊沙坦給藥組（P0.05）。另外，SHR組VSMCs細胞增殖水平均顯著高于相同干預的WKY（#P
圖1各組大鼠VSMCs細胞增殖水平的比較
2.2阿齊沙坦對TGF_β誘導的VSMCs細胞遷移的影響：見圖2。與WKY組相比，SHR組細胞遷移數目明顯增多（#P
圖2阿齊沙坦對TGF_β誘導的VSMCs細胞遷移的影響2.3各組VSMCs中MMP_2、MMP_9、TIMP_1蛋白水平比較：Western blot檢測結果如圖3所示：SHR和WKY組VSMCs，TGF_β刺激組MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表達水平均高于對照組和TGF_β+阿齊沙坦給藥組（P0.05）。各組SHR大鼠VSMCs中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表達水平均顯著高于相同干預的WKY大鼠（P
圖3MMP_2、MMP_9和TIMP_1在各組細胞中的蛋白的表達
2.4各組VSMCs中MMP_2、MMP_9、TIMP_1 mRNA水平比較：RT_PCR檢測結果見圖4。SHR和WKY組VSMCs，TGF_β刺激組MMP_2、MMP_9和TIMP_1 mRNA表達水平均高于TGF_β+阿齊沙坦給藥組（*P
