發布時間：2023-06-26 16:14:48
序言：寫作是分享個人見解和探索未知領域的橋梁，我們為您精選了8篇的法醫學研究樣本，期待這些樣本能夠為您提供豐富的參考和啟發，請盡情閱讀。
關鍵詞：Y染色體；單核苷酸多態性；復合PCR擴增檢測體系；法醫學應用
Y染色體具有男性伴性遺傳特性，呈單倍型向下遺傳，在減數分裂中不發生重組，一般由父親直接傳給兒子。在個人識別方面，由于Y染色體SNPs非隨機分布于人群中，其種群的地域性特異明顯，所以可以用于案件中生物學所屬群體的推斷。尤其在案、案中分析男女DNA混合物時，Y染色體遺傳標記擴增分型技術對單倍型檢測結果的獲得不受女性成分影響，具有其他遺傳標記所沒有的明顯優勢。因此，23-plex Y-SNPs遺傳標記復合擴增檢測體系在法醫學上具有潛在的特殊價值。
1 材料與方法
1.1主要實驗儀器 ①PCR擴增儀：480型、9600型、9700型（Applied Biosystem，美國）；②定量PCR儀：ABI PRISM7500（Applied Biosystem，美國）；③電脈儀：Bio-RAD公司（美國）；④DNA全自動遺傳分析儀：Prism 310、Prism 3130-XL（Applied Biosystem，美國）；⑤高速臺式離心機：ZKl5、ZK3（Sigma，美國）；⑥超純水儀：Millipore（法國）。
1.2主要實驗試劑 ①SNaPshot試劑盒（Applied Biosystem，美國）；②ExoSAP-IT（USB公司，美國）；③蝦堿性磷酸酶SAP（Amersham公司，美國）；④dNTPs混合物（Fermentas，MBI公司，立陶宛）；⑤Amp FL STR Profiler YfilerTM試劑盒（Applied Biosystem，美國）；⑥Quantifiler human DNA quantification試劑盒（Applied Biosystem，美國）。
1.3實驗樣本及其DNA的提取和定量 在公安部物證鑒定中心隨機抽取290名廣東地區漢族無親緣關系的男性個體，使用采血卡或中性濾紙收集他們的指尖血，編號1-290，采用DNAIQTM（Promega公司，美國）試劑盒進行DNA提取，并且采用Quantifiler TM試劑盒（Applied Biosystem，美國）在ABI PRISM7500定量PCR儀上進行定量，4℃妥善保存，以備Y-SNPs擴增體系的建立和PCR反應條件的優化。
1.4 Y-SNPs遺傳標記復合擴增體系的建立
1.4.1 Y-SNPs位點的選擇 根據Y染色體命名協會的在線補充材料，參考Y-SNPs信息的在線網站和dbSNP數據庫信息，在亞洲人群中篩選出多態性較高的單體群以及對應的23個Y-SNPs位點：P164、P203、P148、P145、M89、P151、M216、P128、P157、P149、P131、P199、P123、P191、P201、M1ll、M9、P132、P200、P197、M119、P136和M134。其中，Ml1l是2 bp缺失，M134是l bp缺失突變，M199是1 bp插入，剩下20個位點均為堿基的轉換或顛換。
1.4.2 Y-SNPs位點PCR引物設計與驗證 以NCBI dbSNP數據庫和Genbank中的Y染色體序列篩選的位點及其鄰近序列為模板，參照引物設計的一般原則，使用Primer Premier 5.0軟件自行設計并使用Oligo 6.0軟件進行分析優化。引物合成后，采用基于局部比對搜索工具（BLAST）快速地對比分析它的高特異性。
1.4.3單個Y-SNPs位點PCR擴增體系的建立 單位點PCR擴增體系的建立。1個男性DNA樣本定量后，分別對23個Y-SNPs位點引物進行單獨擴增，建立每個SNP位點均適用的PCR擴增體系。PCR反應體系為25μL，PCR反應條件為：95℃11min，95℃30s、55℃30s、72℃30s，循環35次，最后延伸為72℃10min。
1.4.4 23個Y-SNPs位點復合PCR擴增體系的建立 通過正交實驗的方法，調整PCR反應參數、PCR反應體系中各離子的濃度以及各引物對的濃度，建立23-plex Y-SNPs復合PCR擴增體系。PCR反應體系為25μL，包括：0.4～1ng DNA模板、2.5 U AmpliTaqGold DNA聚合酶、1×PCR buffer、PCR引物濃度在0.006 8～0.0676μmol/L、每種dNTP各600μmol/L、8 mmol/L MgCl2。PCR反應條件為：95℃11min，95℃30s、55℃40s、65℃45 s，循環35次，最后延伸為65℃10min[1]。
1.4.5 PCR反應產物的檢測與純化 首先取15μL 10×上樣緩沖液與2μL PCR產物混勻后上樣至6%非變性聚丙烯酰胺凝膠（C=6%，T=3.3%），450 V電泳2～3h，銀染顯色。然后，使用8μL或7μL酶純化體系進行PCR產物純化。
1.4.6單堿基延伸反應體系的建立及其產物的純化 采用SNaPshot試劑盒（Applied Biosystem，美國）推薦的反應體系：純化后的PCR產物、微測序引物混合物以及去離子水分別2μL，SNaPshot mix 4μL。循環參數為：96℃10 s，50℃5 s，60℃30 s，循環25次。單堿基延伸反應結束后，向反應產物加入1μL SAP（1 U/μL），37℃孵育1h，80℃15 min進行純化處理，并去除多余的引物和ddNTPs。
1.4.7熒光標記和毛細管電泳檢測 ①4種不同熒光物質標記ddNTPs，故ddNTP所發射的熒光量亦有差異，藍色（FAM）、綠色（HEX）、黃色（TAMRA）、紅色（ROX）熒光物質發射的熒光比約為4：2：1：1，判讀結果時必須對不同熒光標記的RFU值進行標準化[2]；②采用3130-XL遺傳分析儀對純化后的單堿基延伸反應產物進行電泳檢測。取1μL純化產物加入10μL Hi-Di甲酰胺中，再加入0.3μL GeneScanTM Size Standards LIZ-120作為內標。進樣時間10s，電壓15kV，POP-4凝膠，36cm毛細管，電泳30min。毛細管電泳結束后，使用Genemapper ID V3.2軟件對結果進行分析。
2 結果
2.1檢測結果 23-plex Y-SNPs電泳檢測顯示：23個位點均為單倍型，各個位點PCR擴增均衡，多次重復試驗結果一致?；蚨鄻有耘c單倍型多樣性的計算公式為：h=n（1-∑X2i）/（n-1）。經法醫學參數計算，23個Y-SNPs位點均具有遺傳多態性，每個位點基因的多樣性范圍為0.0137～0.4912。檢測的290名男性個體中有11種單體群、143種單倍型，其單倍型多樣性為0.9907。
2.2法醫學應用 ①靈敏度：倍比稀釋濃度為200ng/μL的參照DNA，分別進行復合PCR反應和復合單堿基延伸反應，25μL復合體系中DNA含量為0.1～50ng時均可得到較好的分型結果；②種屬特異性：利用磁珠法提取雄性猴、狗、豬、雞、黃牛、山羊、家兔、大白鼠等動物的DNA.建立復合PCR擴增體系，結果顯示動物標本中均未檢測到任何Y-SNPs位點；③組織同一性：任何男性個體自身的骨骼、肋軟骨、肌肉組織、皮膚、肝臟、血痕、指甲等進行23-plex Y-SNPs復合檢測，分型一致。
3 討論
本研究建立的23-plex Y-SNPs復合檢測體系具有良好的男性特異性和種屬特異性，檢測靈敏度高、重復性好。23-plex Y-SNPs復合檢測體系在法醫學上的應用是可行的，尤其是對父系家族的親權鑒定、無名男尸的個人識別、混合斑男性成分的檢驗等具有積極意義[3～6]。常規DNA指紋、ABO血型、酶型、RFLP、STR等傳統的法醫學物證檢驗在法醫學實踐中均存在一定的局限性。在刑事案件中，尤其是涉及追溯父子關系和性犯罪的案件，譬如：內褲上精斑等犯罪案件的檢驗樣本，采用直接檢測Y-SNPs的方法可有效避免傳統檢測的繁瑣步驟，從而快速獲得準確的檢測效果。在23-plex Y-SNPs系統的基礎上，聯合使用STR系統和常染色體SNP檢測系統，其結果清晰、靈敏度高、重復性好、穩定性強，在法醫學領域有廣闊的應用前景。
參考文獻：
[1]鄧志輝，李茜，吳爽，等.17個Y-STR基因座在親子鑒定中的應用研究[J].中國實驗血液學雜志，2008，16（3）：699-703.
[2]新堯，楊慶恩，劉超，等.法醫物證學實驗指導[M].北京：人民衛生出版社，2008：68-76.
[3]張愛平，劉超，劉長暉.Y染色體SNPs及其在法醫學中的應用[J].刑事技術，2009，5：32-34.
[4]鄧志輝，李茜，吳爽，等.17個Y-STR基因座在親子鑒定中的應用研究[J].中國實驗血液學雜志，2008.16（3）：699-703.
（一）嚴格的司法鑒定機構準入制度在德國，司法鑒定管理部門對鑒定機構的準入管理非常嚴格，德國的認證體系建設方面有將近一百年的經驗，德國國家認證中心（DAKKS)承擔德國認證認可的所有工作，涉及檢測實驗室、校準實驗室、檢查機構、產品認證機構、人員認證機構、質量體系認證機構、環境管理體系認證等領域，該公司不以盈利為目的。德國的第三方認證體系成熟，條件優越，經驗豐富，這無疑給司法鑒定機構的準入認證提供了有力的技術保障。
（二）鑒定機構獨立，分工明確歐洲被國際上認為是法醫學發展最迅速、體制最為完善的地區之一，其中首屈一指的是德國，德國的法醫鑒定工作是由各醫學院校的法醫學研究所承擔，法院、檢察院和警察局均不設法醫。法醫學研究所、法院、檢察院和警察局均為獨立的機構，分工明確，互不沖突，醫學院校的法醫學研究所不承擔刑事訴訟的職責，其鑒定結果受外界干擾的因素少，這樣有利于保證法醫鑒定工作結果的真實性和可靠性。
（三）以學術科研為依托的鑒定機構在德國，各大法醫研究所的教授和資深專家均有自己的科研工作，并與警察局有專業協作和科研合作關系，其科研成果對具體的法醫鑒定工作起到輔助作用。在荷蘭，鑒定師除了日常的工作外，還需要進行技術研究項目，保證鑒定技術開發方面處于領先地位。
（四）嚴格的質量控制體系在美國，法醫鑒定體系具有嚴格的質量控制體系，其質量控制包含能力驗證、實驗室審計、技術審查和糾正措施程序。通過能力驗證可以評估技術人員所運用鑒定方法是否恰當、結果是否正確、對材料的污染以及實驗室的真實情況。實驗室審計由內部同行審計到由ASCLD/LAB（美國社會犯罪實驗室/實驗室認可委員會）的認證檢查員組成專業小組執行全面的審計工作。糾正措施程序是要求一旦能力驗證發生偏差或者實驗室出現錯誤的情況立刻察覺并要及時改正。美國的法醫鑒定質量控制體系在全世界范圍內處于領先地位，嚴格的質量控制保證了鑒定結果的客觀公正。
二、我國法醫鑒定體制
從國外的法醫鑒定體制的特點來看，其發展狀態已經呈成熟趨勢，只有健全的法醫鑒定體制，才能夠體現法醫的司法公正，與國外法醫鑒定體制相比，我國的法醫鑒定體制發展延遲，現將我國法醫鑒定體制的缺陷總結如下：
（一）司法鑒定機構準入制度松弛在我國，社會上存在大量的社會中介機構，同時，很多司法鑒定機構也是為了應對政策而倉促設立的，許多條件相對不足的機構趁機混入司法鑒定隊伍，導致鑒定機構過多過濫。由于鑒定部門數量眾多,各鑒定機構的硬件和軟件條件層次不齊，當事人根據有利于自己的鑒定結論為依據選擇鑒定機構，導致了社會上重復鑒定、多頭鑒定的現象層出不窮，嚴重影響了司法鑒定的公正和公平性。
（二）法醫司法鑒定管理體制不完善由于國家沒有法律明確法醫鑒定工作的主管領導部門，造成長期以來鑒定機構缺少宏觀調控的政府管理機構，從而引發了一系列的問題，例如各鑒定機構的技術水平不均衡、鑒定機構及鑒定人資格準入的權限隨意性大、缺少統一的法醫學司法鑒定技術標準、沒有嚴格有效的質量控制體系、領導班子職責不清等，導致了司法鑒定體系的工作人員工作狀態大都各行其事、混亂無序。最終嚴重阻礙了我國司法鑒定工作的有序進行，更無從談起發展和進步。
（三）缺乏法醫司法鑒定標準在不完善的管理體制下必然導致缺乏統一的法醫學司法鑒定標準，國家沒有統一的鑒定標準，各系統按照自己情況制定標準，鑒定標準五花八門，互不影響約束。證據采信存在任意性，缺乏公允性。在鑒定結論的認定上，無法律規定的標準，法官自由裁量權太大，裁判的公正受到質疑。
（四）法醫職責制度不明朗在國內，多數法醫學專業人才出自醫科大學法醫學系，但是目前的情況是由于社會就業壓力，許多法醫學專業的人才畢業后很難進入司法機關從事法醫學專業技術工作。法醫鑒定機構的工作人員大多為兼職，他們在干好自己的本職工作的前提下還要從事法醫鑒定機構的鑒定工作，在巨大的工作壓力下，最終會直接影響到法醫司法鑒定的準確性和科學性。此外，由于法醫工作者是屬于高體力、高腦力和高風險職業，相比于法官、檢察官等職業，收入較低，待遇較差，導致法醫工作者工作積極性差，從而間接影響其工作質量。
三、討論
關鍵字：外語教學 外語教學研究 研究方法
身為一名一線外語教師，經常會在教學實踐工作中遇到這樣或那樣的問題和困惑，有時還會嘗試調整或者改變來解決這些問題。與此同時，隨著教育技術和互聯網技術的革新和發展以及"以學生為中心"、"學生自主學習"等理念的普及，微課、慕課等全新的"教學形態"正發揮出各自的優勢，為當前的外語教學注入了新的活力。廣大大學英語教師理應不斷學習新方法、新理論，在實踐中不斷尋找合適的教學方法。這些看似很宏觀、很空洞的問題需要教師在實踐中不斷微觀化、具體化，畢竟，筆者認為，外語教學研究的最終目的是為外語教學服務，促進外語教學效果的提升。但如何將一個外語教學中遇到的問題變成一個可以研究、具有可操作性的課題，怎樣一步步開展前期的調查、收集數據，怎樣加工和分析數據，怎樣寫出研究論文，這需要我們以更加深入的學術視角看待外語教學，探討英語教學中出現的問題，更好地理解它們，并找出解決這些問題的答案。
外語教學研究方法五花八門，國內外學者有不同的分類，如定性研究、定量研究、質化分析等。其中最為廣大研究者熟悉的有問卷調查法、訪談法、觀察法、有聲思維法、實驗研究法等。以下將以這幾種方法為中心，介紹幾種方法的優劣勢以及各自的適用環境。
問卷調查法和訪談法都是外語教學領域常見的研究和數據收集方法。問卷調查采用書面形式進行，所選樣本可以很大，實施起來費用低廉效率高，被調查者可以匿名回答的，從而收集到較多的數據；訪談調查法調查者直接開展且受制于人數限制，樣本數量往往較小，費時費力。有時還會遇到被調查者不配合的情況，影響數據的收集。從結果來看，問卷調查的結果比較整齊統一，便于研究者統計。訪談調查法的結果可能由于被調查者的不同而千差萬別，研究者難以控制和統計。問卷調查與訪談調查各有其優缺點，研究者還應把兩者結合起來使用為好。
觀察法是外語教學研究領域使用廣泛的另一種方法。研究者可以使用這一方法對教師及學生在教學過程中采取的方法、策略和行為等進行觀察，觀察學習者如何使用語言、教師的教學語言有哪些特點、教學過程中教師和學生如何互動等。雖然觀察的內容很多，仍需注意掌握方式方法。首先，不能受限于某一次觀察的結果，必須多次觀察，認真觀察；其次，觀察前應制定計劃，且計劃應有變通性，根據被觀察對象隨時調整變化；第三，對觀察到的內容，包括觀察者的主觀感受要及時記錄，作為后續開展研究工作的依據。
有聲思維法，又稱有聲思維資料分析法，來源于心理學研究，是將大腦里正在進行的思維活動有聲化。在外語教學研究中，研究者要求受試者在進行試驗任務時盡可能說出大腦的思考內容，研究者用攝錄設備記錄這一過程，之后把受試說出的話轉寫為書面文本，用于進一步的研究。對有聲思維法的質疑一直存在，主要有方法效度不高、對被試者的思維活動有反作用力、進而影響其思維活動、語言究竟能夠在多大程度上反映思維活動、受試者說話的語氣無法在轉寫文本中反映出來、實驗獲得的數據無法與其他方法的研究數據相互印證形成支撐以及研究者和被試者均需經過一定的培訓。因此，這一方法具有較大的局限性。
實驗研究法的目的是探究某些變量之間可能存在的因果關系。為了達到研究目的，研究者會就研究結果提出預測或假設，建立某種環境或條件，控制或操縱某些因素，例如讓受試者接觸某種變量，再測量或觀察實驗處理的效果。與問卷調查和觀察法的區別在于，實驗研究法對研究環境施加人為的調控。另外，為了探究實驗處理即自變量的效果，實驗中要對無關變量予以控制。為了做好實驗研究，研究者應在查閱相關文獻的基礎上提出具體的研究問題和具體的研究假設，包括做好受試者的抽樣以及對無關變量的控制、設計好測量工具和研究進行的程序。實驗后，用恰當的方法分析和討論獲得的數據，才有可能做出令人信服的結論。實驗研究法的不足之處在于受試者數量不宜過多、實驗時間不宜過長，實驗中的自變量、因變量等難以具體化、標準化。因此，實驗研究法對于主要以人為研究對象的外語教學研究來說并不完全適合，或者說，不應成為開展外語教學研究的主要或唯一方法。
行動研究是外語教師以研究者的身份對外語教學中出現的問題進行系統探究的過程。在研究過程中，研究問題由教師自己提出，研究對象是自己的學生、自己的教學以及與自己的教學工作密切相關的問題，研究目的就是改進教學、提高教學質量，促進教師的職業發展，是教師能更新理念和提高教學技能。在行動研究中，教師不但是研究的設計者、實施者和評價者，也是研究成果的使用者。在行動研究過程中，教師系統地使用各種方法如觀察、錄音、錄像、記錄日志、觀察筆記等方法去收集數據，并對數據進行分析和解釋?？梢哉f，行動研究是外語教師發現、提出問題，以及反思和解決問題的探究過程。行動研究的實施不但能幫助教師解決教學中遇到的問題，而且能促進教師職業發展。相較于實驗研究，行動研究中人為控制因素較少，有詳細的操作步驟，更適合廣大一線教師在日常教學工作中開展。
臨床教師不斷地改革和完善教學內容和方法當前,隨著科學技術的不斷發展,醫學領域也獲得了突飛猛長的進步,特別是分子生物學研究技術的出現、發展和完善,人類基因組計劃的超常規發展,醫學知識日新月異,人們對疾病有了全新的認識,臨床診治和預防水平有了很大提高,人類疾病譜也發生了很大的變化,現有的教科書和教學大綱已很難跟上現代醫學的發展,因此必須緊密結合醫學發展的動態來積極開展臨床醫學教育。以婦產科疾病的教學為例,婦科腹腔鏡是融現代婦科手術和內鏡診治技術為一體的微創傷婦科診治技術,也是當今婦科領域的一門新興學科。婦科腹腔鏡技術的興起與發展,使傳統的婦科診斷與治療發生了前所未有的深刻變革,并在很大程度上影響和改變著婦科診療的面貌,為新世紀婦科技術的發展帶來了光明前景。同時新技術的發展非一蹴而就,而是多因素共同作用的結果,所以婦科腹腔鏡技術也正是在發展中完善,完善中發展!這就要求臨床教師必須根據這些變化及時調整授課內容和學時安排以滿足這些變化,學習內容和臨床實際的脫節不能滿足現代臨床醫學教育的目的和宗旨。
科學技術的迅猛發展使得人們的溝通途徑也變得十分暢通和便利,互聯網的出現和不斷完善,人們獲取知識的途徑變得非常快速和直接,也為總結和分析醫學發展的動態提供了更多更全面的第一手資料,現有的教科書很難全面反映醫學發展的實際情況,這給現代醫學教育提出新的挑戰,它要求臨床醫學教師必須不斷學習和掌握相關知識,及時跟上醫學發展的步伐和滿足學生的學習需求,固步自封、不思進取則要被現代醫學所淘汰。隨著國內市場經濟的不斷發展和完善,醫療市場也較以前發生了很大變化,病人就醫有了很大的選擇性,對醫院和醫生乃至診治方案的選擇有了更多的自主性,同時人們法律意識和自我保護意識也在不斷加強,因此醫院和臨床醫生在日常醫療和教學活動中必須尊重病人的選擇權、知情權、隱私權等有關權利,這給臨床醫學教學提出新的挑戰。如果不能正確處理醫療和臨床教學的關系,將不可避免地產生一些醫療糾紛甚至是法律糾紛,也使醫院在醫療市場的競爭中產生不利因素,反之,如果處理得當,不僅有利于醫學教育,也有利于提高醫院和醫生自身的聲譽,而在醫療市場的競爭中處于不敗之地。目前我國相關法律、法規也還不完善,滯后于目前醫療形勢的改變,如何確保臨床醫學教學的正確和合理、合法地開展,不僅是臨床教師所必須關心的問題,而且涉及到相關法律、法規的制訂和完善。因此既往臨床醫學教育模式和教學方式、方法已不符合當前醫療市場的變化,作為臨床教師,應提高法律意識,正確處理好醫療和教育的關系,取得病人和家屬的配合來積極開展臨床醫學教育,為培養新一代臨床醫生和拓展醫療市場而積極努力。
醫學教育模式的改革也給臨床醫學教師提出了新的要求。學生的臨床課程將在臨床醫學院內實習時同步進行,學生的大部分課余時間在醫院度過,學生將有更多時間與病人接觸,這有利于提高臨床醫學教學質量和學生的綜合素質。但如何利用學生在醫院的時間培養學生正確和基本熟練的臨床思維和處理能力,也給臨床教師提出了新的要求。舊的教學模式下教師按病種講完課或帶完見習后便完成任務這種情況將一去不復返。學生在醫院內與病人接觸,隨時會遇到各種各樣的問題和困惑,包括醫學、心理學和社會問題,甚至語言問題,這都要求臨床教師花許多時間來解釋和教導。單一按病種來講習對學習臨床課程是最基本的,如果沒有這個基礎,學生的臨床能力無從談起,但對一個合格的臨床醫生來講,僅做到這一點是遠遠不夠的。教師在平時的講課和學生見習、實習過程中,應結合學生的自學和接受能力,把疾病的臨床特點、診斷、鑒別診斷和治療作為教學重點,并把它灌輸于整個教學過程中,而疾病的病因學、發病原理和病理解剖等基礎內容可簡單地講解或由學生自學,這樣有利于學生臨床思維的培養和處理問題能力的提高。因此在臨床教學活動中可以以臨床癥狀為主線多講解,在此基礎上再深入講解具體疾病各自的特點和處理要點。另一方面,在以前的教學模式下,往往對學生的臨床基本功重視不夠或無法給予更多的教導,而在新的教學模式下,學生在見習、實習過程中,我們認為臨床帶教老師要用一定的時間來訓練學生的臨床基本功,如采集病史(包括內容和技巧)、體格檢查和臨床基本操作等,并作嚴格要求,因為扎實的臨床基本功是一名優秀臨床醫生的基礎。另外,要做好一名優秀醫生,必須了解病人的心理狀態,與病人之間的接觸、溝通是非常重要的,這對于了解病情同樣也是缺不可少的,在這方面也要求帶教老師予以重視。因為一名醫學生或年輕醫生,在這一點上往往欠缺和難以領悟,需要在臨床醫療活動中不斷充實、完善。
二、臨床教師自身綜合素質要進一步提高
為提高教師的授課能力和效率,我院已多次開設青年教師授課大獎賽,并對剛畢業的青年教師進行崗前培訓,使臨床老師的授課能力得到了提高。要作好一名優秀的臨床教師,不僅要培養高素質的臨床醫生,還要培養學生正確的臨床思維能力包括臨床診斷和處理能力,單純地提高授課效率是遠遠不夠。首先必須要有強烈的責任心,不能敷衍了事。對于一名臨床醫生,要帶教一、二名學生并不是一件難事,難就難在認真和帶好二方面,沒有一定的責任心,不認真帶教是很難培養出優秀醫生的。一名好醫生不等于是一名好老師,要做好一名臨床教師,除做好自己醫療和科研的工作外,還必須負起責任,認真培養下一代醫生,才能使我國臨床醫學不斷發展和進步。其次,帶教老師必須提高自己的知識水平。因為醫學發展迅速,知識更新快,人們獲取醫學知識途徑既多又直接(包括醫學知識講座、書籍雜志、通信、互聯網等形式),這要求任何一名臨床醫生都必須不斷學習和鉆研,這樣才能在醫學界立于不敗之地,對臨床教師而言尤其重要,只有自己不斷進取,才能滿足學生的學習要求。因此,一名好的臨床老師首先必須是一名好醫生。
三、積極開展豐富多彩的臨床教育形式,以滿足學生的學習需求
各位領導、各位來賓、老師們、同學們：
大家好！
今天是我們2003級研究生開學典禮的日子。在這個十分激動值得紀念的日子里，我謹代表2003級全體研究生向學校各位領導、老師及全體教職員工致以崇高的敬意！
首都醫科大學是一所歷史悠久、專家云集、教學科研力量雄厚，醫療技術水平高超，國內知名的醫科大學。在“重教勤學、尊師愛生、艱苦奮斗、求實創新”校訓的激勵下，經過艱苦拼搏，**大人才輩出，碩果累累。我們有幸成為其中的一名學生，心中感到無比自豪。
同學們，學習機會來之不易，我們應當倍加珍惜，學有所成。在今后的學習過程中我們應該做到：
第一、明確目標、虛心好學、博采眾長
研究生的學習是高層次的學習，這種定位要求我們必須樹立明確的專業目標，首先應該掌握好自己的專業知識，而且要掌握求取知識的方法。不僅要完成自己的課程學習，而且應該有意識的培養鍛煉自己獨立的科學思維能力；不僅要深入學習本專業、本學科，而且要廣泛涉獵其它領域，醫學模式的轉變要求我們懂得更多的社會科學邊緣學科，比如心理學、倫理學、衛生法學等。只有博大，才能精深，這樣我們才能成為一名既精通本專業又相關知識豐富的名符其實的醫學工作者。
第二、學以致用、勇于開拓、善于創新
我們知道現代社會越來越注重能力的提高，而不再是資歷、學歷。我們不僅要掌握專業知識，更應具備運用專業知識的能力。在認知過程中學會思考、學會實踐，始終遵循實踐——認識——再實踐——再認識的認識運動總規律。同時我們應該培養自己的創新能力、協作能力、交流能力和管理能力，而不是只局限在書本知識之中。
第三、提高素質、加強修養、接受挑戰
沒有高尚的道德情操，不可能成為一名真正能推動社會進步的人。古語云：醫者仁術也。作為未來的一名合格醫務工作者，我們不僅應該具備精湛的專業技能，而且還要具有高尚的道德情操。各位同學，我們在即將的學習生活中，應該嚴格要求自己，努力規范自己的言行，提高自身的思想素質，健全自己的人格，培養自己的責任心與使命感，樹立良好的醫德醫風，在醫學實踐中不斷升華自己的精神境界，為把我們培養成一名德藝雙馨的醫務工作者而努力。各位朋友，經過SARS的考驗我們深深的感受到了肩上責任的重大，祖國和人民的殷切期望，讓我們團結起來，以“三個代表”為指導，艱苦奮斗，求實創新，抓住機遇，在21世紀建設祖國的浪潮中奏響我們青年的樂章。
同學們，今天我們共同走進了我們向往已久的醫科學府，我們將謹記校訓，立志成才、勤勉刻苦、決不辜負老師對我們的殷切希望，同學們，作為一名立志報效祖國的醫務工作者，你們做好準備了嗎？
關鍵詞口腔醫學專業；學生；法律意識；法律教育
一、口腔醫學專業學生法律意識現狀
（一）法律意識淡薄目前越來越多的九五后青少年開始步入醫學院校，這個年齡段的大學生大多屬于獨生子女，依賴性較強，在剛剛結束緊張的高三學習生活后，又來到一個學習生活更為緊張忙碌的醫學院校，往往需要度過一個較長的心理適應期。而在這樣一種延續性的忙碌學習過程中，法律知識的學習很容易被忽視，更談不上應用，導致普遍性的存在法律意識淡薄。（二）醫學院校法學教育充斥著應試色彩醫學院校課程設置中醫學基礎課和專業課占了絕對的比重，人文社科類課程比重較輕。大多數醫學院校的法學教育是通過《思想道德基礎與法律修養》這一門課進行的，傳統的課堂教學方法加上考核方式，難以讓學生真正掌握相關法律知識，而針對職業能力的實用性法律知識講授更是很少，學生很難做到通過學習將法律知識轉化為實踐技能，更談不上在執業過程中自覺運用法律知識防范和處理醫患糾紛等復雜法律事務。（三）口腔醫學專業學生法律教學理論與實踐脫節目前，尚無專門針對口腔醫學專業學生的法學課。法學教師在授課過程中，通常注重法律條文的講解，忽視法條背后的原理、方法，學生較少確切理解某個法律條文的真正要義?？谇会t學專業學生不同于其他臨床專業學生，在校期間的實習見習就需要在相對獨立的空間獨自面對病人，是醫學生中較早直接接觸臨床的一類學生，面對日益紛繁的醫患關系，尚未走出校園的學生往往顯得無所適從。
二、口腔醫學專業學生法律意識養成應有的教學內容
（一）基礎法律知識教育根據醫學專業的培養計劃和目標，應該確定相應的法律知識教育教學規范大綱。包括法律原理的學習，主要指的是為法律規定提供基礎性、準則性、規范性指引的理論；法律基本知識，主要包括憲法和一些大部門法，如刑法、民法、訴訟法、行政法等；醫學生專業法知識教育，即衛生法、《中華人民共和國傳染病防治法》、病歷書寫要求、處方質量要求、醫療安全教育、《中華人民共和國執業醫師法》、《醫療事故處理條例》等；運用衛生法學實踐知識，醫學生能夠將所學醫學和法學知識融會貫通，形成合理的知識架構，在醫療過程中自覺運用法律思維、法律知識規避風險，解決問題。（二）實習前醫用法律知識教育口腔醫學是實踐操作較多的一個學科，實習生要從課本的學習中迅速轉到臨床操作上來，即便是有帶教老師的指導，但也需要面對病人獨立操作，即使是一開始最簡單的“牙拔除術”、“根管治療術”也具有不可逆性，學生通常會存在一定程度上的不自信，加上患者的不信任以及對新出臺的醫療法規的不確切理解，都會帶來帶來一定程度上的實習困難。因此學生進入臨床實習前，除打牢專業基礎課知識外，還應強化醫事法律學習，需要通過討論教學法、案例教學法、辯論教學法、專題教學法等四大教學法對學生進行：1．語言交流培訓，學會聆聽患者的述求，從中準確把握患者表達的信息，同時向患者或家屬介紹病情以及可能發生的風險和醫療行為中會采取的相應措施，又不至于讓病人感到害怕；2．強化《醫療機構病歷管理規定》學習，嚴格按照《醫療機構病歷管理規定》書寫病歷；3．初步具備一定的法律能力，包括法治思維、法言法語表達、對法律事實的辨析能力。以便學生更好掌握與病人溝通交流的方法。（三）貫穿始終的法律教育要讓學生真正遵紀守法，靈活運用法律，就要在學校營造依法治校的良好人文氛圍。1．教師在授課過程中要突破傳統教學模式的藩籬，將法學教育成為醫學生人文素質培養的一個重要部分，通過案例教學、PBL討論、模擬法庭、實地參觀等多種形式完善法學教育。2．充分發揮學校文化的積極效應，通過宣傳欄、校園網、?？约耙恍┬旅襟w如微博、微信公眾號適時傳播法律知識，使法律意識在潛移默化中進入醫學生的大腦。3．發揮學校團委、學工部門、心理輔導站的作用，通過職業規劃大賽、心理講座等形式引導學生專業認同感，養成良好心理素質。4．開展豐富多彩的校園活動，舉辦專家講座論壇介紹衛生法律實際運用案例，組織以法律為主題的演講比賽、辯論賽、知識競賽、主題班會等，還可結合專業在雕牙比賽、科普大賽作品征集、臨床實踐技能操作和病歷書寫知識講座和比賽中宣傳法律知識，使醫學生在此活動中逐漸增強法律意識。
三、口腔醫學專業學生法律意識養成教學體系的建立
根據上述內容，即基礎教學部分、臨床實習前教育、日常法律意識養成教育三部分，通過理論課教學、實踐教學、校園文化活動三個部分，形成口腔醫學專業學生法律意識養成教學體系。見圖1。教學體系形成后，各教學內容應分別占什么權重呢？為進一步明確各項教學內容所占權重，筆者從法律知識、法律道德、法律觀念、法制能力、法律心理等5個部分設計《口腔醫學專業學生法律意識問卷》。本次調查共向600名口腔醫學專業的學生發放問卷，回收有效問卷528份，男女比例為1:1.25，其中，一年級學生113人，二年級學生125人，三年級學生146人，四年級學生112人，五年級學生104人。通過調查發現：口腔醫學專業學生法律觀念普遍形成，相關的法律知識掌握較差，在日常生活中自然產生的法律道德情況良好，但法律能力幾乎都未形成，更談不上上升為法律心理，不習慣于通過法律的思維模式去面對解決問題。因此按如下權重設置口腔醫學專業學生法律意識養成教學體系內容權重劃分。隨著我國醫療衛生行業制度的規范化，醫學生的法學素養成為一名合格醫學生不可或缺的素養之一，該系統可以及時調整教學大綱，在課程設置上不但覆蓋該大綱要求，且在深度和廣度上更上一層，具有較強的針對性，將醫學和法學融為一體，較之以往傳統授課方式更具有科學性和操作性。
參考文獻：
[1]張會萍．醫學生法律素質教育目標評價體系研究．河南工業大學學報（社會科學版）．2008（12）．
[2]錢亞芳．關于構建醫學生法律教育體系的思考．西北醫學教育．2003（12）．
[3]高潤濤、李燕．提高實習階段口腔醫學生法律意識防范醫療風險．北京口腔醫學．2012（12）．
[4]馮玉芝．醫學生法律素質教育的途徑與措施．遼寧醫學院學報．2007（2）．
[5]張鵬．論加強醫學生法律素質教育的對策．西北醫學教育．2009（10）．
[6]向澤敏．加強醫學生法律素質教育的思考．新課程．2009（10）．
【摘要】 在細胞內部，當黏著斑激酶（focal adhesion kinase， FAK）受到細胞外刺激時，即被激活而發生磷酸化，磷酸化的FAK激活下游的因子而改變細胞行為。FAK是細胞內部重要的信號轉導分子，它在信號從表面受體轉導至細胞核過程中起到關鍵作用。這樣， FAK與細胞內多種分子相互作用，進而參與了多種細胞功能的調節，如細胞的擴散、遷移、細胞增殖、凋亡和細胞的存活，在法醫學上研究FAK也必將具有十分重要的意義。
【關鍵詞】 法醫病理學；黏著斑激酶；損傷；時間推斷
黏著斑激酶（focal adhesion kinase， FAK）是非受體蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase， PTK）的一種，主要分布在胞漿中，起著介導細胞黏附、遷移、生存及細胞周期調控等重要作用。FAK與其他信號轉導途徑的相互作用機制及其在細胞凋亡中的作用特點是近期研究的熱點，本文綜述FAK在組織損傷中的研究進展及其法醫學意義。
1 FAK的生物學特點
1.1 FAK的結構
FAK也稱pp125FAK， 1992年由Hank等從v-src轉染的雞胚成纖維細胞中克隆鑒定出來，因與細胞粘附關系密切，故命名為黏著斑激酶（FAK）。Pyk2 （ Protein-rich tyrosine kinase 2） 是一種富含脯氨酸的非受體酪氨酸蛋白激酶2，又稱細胞粘附激酶β（CAKβ）；相關粘著斑酪氨酸激酶（RAFTK）；Ca2+依賴性酪氨酸激酶（CADTK） 或粘著斑激酶2（FAK2） ，是FAK家族的新成員，分子量為116kD。
FAK可分為三個功能區：N-端區、激酶區和C-端區。其中C-端區的第856-1012位氨基酸構成黏著斑的定位區（focal adhesion targeting， FAT）是FAK結合到黏著斑（FAP）上必要的序列［1］。FAK有6個可磷酸化的酪氨酸位點，即Tyr397、Tyr407、Tyr576、Tyr577、Tyr861、Tyr925。C-端區還有兩個富含脯氨酸區域。Tyr397是主要的自主磷酸化部位，與Src家族直接作用。Tyr576和Tyr577是Src家族激酶磷酸化的主要部位。磷酸化的Tyr925可與生長因子受體結合蛋白2（growth factor receptor binding protein 2， Grb2）結合。Tyr407 和Tyr861可能是與其他SH2（Src-homology 2）蛋白結合的部位。位于C-端的兩個富含脯氨酸區：PR1和PR2，是含有SH3結構域的蛋白質的結合部位，如Cas（Crk-associated substrate）等。這些C-端區域都是FAK發揮信號功能的關鍵部位［2］。
1.2 FAK信號傳導通路的激活與細胞周期調控機制 Zhao J等［3］發現NIH3T3細胞中FAK突變體通過與內源性FAK競爭結合黏著斑處的信號分子（如Src），可導致細胞周期停滯于G1期，揭示FAK在調節細胞周期中的作用。同時應用cyclinD1啟動子熒光酶分析，證實FAK在轉錄水平調節cyclinD1表達?；罨腸yclinD與細胞周期蛋白依賴激酶4/6 （cyclin-dependent kinase4/6， CDK4/6）結合，磷酸化視網膜母細胞瘤蛋白，導致原與去磷酸化視網膜母細胞瘤蛋白結合的轉錄因子E2F-1/DP-1異二聚體釋放，激活與S期DNA合成相關基因的轉錄，使細胞進入S期。這樣，FAK參與完成一個細胞周期的調節。
整合素（integrin） 是一類重要的細胞表面受體家族，其與細胞外基質（ECM）配體結合后，促使黏著斑形成。整合素β1、β3和β5亞基的胞質端與FAK的N端區結合，從而引起FAK構象的改變，使激酶結構域處于活化狀態。同時，Tyr397自身磷酸化，消除了Src的自體抑制，活化的Src催化FAK的Tyr407、Tyr576、Tyr577和Tyr925磷酸化，使FAK完全活化，FAK與Src結合形成FAK/Src復合體后FAK被激活，激活的FAK一方面磷酸化樁蛋白（Paxillin）和Cas的酪氨酸殘基，通過接頭蛋白Crk的SH3區與C3G結合，而C3G是公認的Ras鳥苷酸交換因子，進入Ras途徑；另一方面，FAK/Src復合體導致Tyr925磷酸化，磷酸化的Tyr925處肽模體TENN可與另一種接頭蛋白Grb2結合，Grb2的SH3結構域可與另一種鳥苷酸交換因子SOS（son of seven-less）結合，進入Ras途徑 ［4］。由此可見，磷酸化FAK通過以上兩種途徑均可激活下游的因子，完成FAK信號傳導過程。
2 FAK信號傳導通路的法醫學意義
目前學者對FAK信號傳導通路研究，主要涉及中樞神經系統損傷、皮膚損傷和骨骼肌損傷等。FAK信號傳導通路在這些組織損傷中的作用特點與規律應用在法醫學上，具有十分重要的意義。
近年來，有關腦缺血再灌注損傷和腦創傷的研究較多，研究者認為細胞信號傳導參與調節中樞神經系統神經細胞的損傷。Ziemka-Nalecz等［5］建立沙鼠前腦短暫性腦缺血損傷模型，利用Western blot雜交法和原位酶譜法，發現傷后3h磷酸化FAK蛋白表達量升高，6h為表達高峰，其后開始下降；傷后3hFAK/p130Cas（一種接頭蛋白）復合體表達量上升，6h達到高峰，到72h降至基礎水平，正常對照組未見陽性表達。因此，損傷可使腦組織細胞內的FAK激活，作為早期細胞內參與這一應激反應的調節，其表達具有一定的時間規律性［6］，可將其作為一種客觀指標進行研究，用于法醫學鑒定中腦損傷時間的推斷。
皮膚損傷是法醫學實踐中常見的損傷之一，通過皮膚損傷推斷時間在法醫檢驗中占有很重要的地位。Roy等［7］發現在8周幼鼠背部皮膚切口周邊區內源性低濃度的H2O2誘導FAK雙位點（Tyr861＆Tyr925）磷酸化，其他位點對H2O2不敏感?；罨腇AK通過多種機制調節血管發生，如肌動蛋白應激纖維／黏著斑形成、加強血管內皮細胞屏障作用、促進血管內皮生長因子釋放及調節整合素敏感信號通路等，對皮膚損傷愈合起到了關鍵作用［8，9］。
骨骼肌損傷在尸檢過程中也極為普遍。Peng Xu等［10］利用FAK轉基因大鼠后肢骨骼肌缺血損傷模型，借助免疫組織化學和數量分析的方法，發現股動脈結扎4周后，FAK轉基因大鼠骨骼肌產生大量新生血管，并且與對照組有顯著性統計學差異［11］。骨骼肌損傷后再生是一個復雜的過程，包括衛星細胞的活化、遷移、溶解和損傷的肌纖維再生，血管內皮細胞中FAK大量表達能夠促進缺血損傷處血管的新生，有利于大鼠骨骼肌損傷后愈合［12，13］。因此，FAK的表達有一定的時間規律，可作為診斷肌肉損傷和推斷肌肉早期損傷時間的一項指標。
3 應用展望
在法醫工作中組織損傷較為常見，法醫學者長期以來一直致力于尋找損傷后短時間內出現的各種能推斷損傷時間的指標，尤其是生前損傷后存活時間短暫，損傷形態學改變不明顯，損傷時間難以確定的案例。以往多通過觀察生理反應和蛋白質定量檢測等方法推斷，但對傷后存活短暫，尤其傷后8h內存活時間的推測還有待于進一步研究。目前國內外有關FAK信號通路在組織損傷中的時間規律性變化的研究還較少，尤其在法醫學領域用于人體損傷時間的推斷有待于進一步的探討。FAK信號傳導通路在組織損傷后早期即激活。損傷后短時間內，FAK表達顯著且具有時間規律性。因此，FAK信號通路應用于法醫學上將有重要的意義。
【參考文獻】
1 Bertolucci CM， Gubao CD， Zheng J. Structural features of the focal adhesion kinase-paxillin complex give insight into the dynamics of focal adhesion assembly. Protein Sci， 2005， 14（3）: 644-652.
2 Wisniewska M， Bossenmaier B， Georges G， et al. The 1.1 A resolution crystal structure of the p130cas SH3 domain and ramifications for ligand selectivity. J Mol Biol， 2005， 347（5）: 1005-1014.
3 Zhao J， Pestell R， Guan JL. Transcriptional activation of cyclin D1 promoter by FAK contributes to cell cycle progression. Mol Biol Cell， 2001， 12（12）: 4066-4077.
4 Wang JG， Miyazu M， Xiang P， et al. Stretch-induced cell proliferation is mediated by FAK-MAPK pathway. Life Sci， 2005， 76（24）: 2817-2825.
5 Ziemka-Nalecz M， Zalewska T. Transient forebrain ischemia effects FAK-coupled signaling in gerbil hippocampus. Neurochem Int， 2007， 7（4）: 287-285.
6 張曉燕，楊金升，谷有全，等. 細胞外信號調節激酶在局灶性腦缺血中的表達. 第四軍醫大學學報， 2007， 28（2）: 104-107.
7 Roy S， Khanna S， Nallu K， et al. Dermal wound healing is subject to redox control. Mol Ther， 2006， 13（1）: 211-220.
8 Park SG， Shin H， Shin YK，et al. The novel cytokine p43 stimulates dermal fibroblast proliferation and wound repair. Am J Pathol， 2005， 166（2）: 387-398.
9 Wert MM， Palfrey HC. Divergence in the anti-apoptotic signaling pathways used by nerve growth factor and basic fibroblast growth factor （bEGF） in PC12 cells: rescue by bEGF involves protein kinase C delta. Biochem J， 2000， 352（15）: 175-182.
10 Peng X， Ueda H， Zhou H， et al. Overexpression of focal adhesion kinase in vascular endothelial cells promotes angiogenesis in transgenic mice. Cardiovasc Res， 2004， 64（3）: 421-430.
11 Wert MM， Palfrey HC. Divergence in the anti-apoptotic signaling pathways used by nerve growth factor and basic fibroblast growth factor （bEGF） in PC12 cells: rescue by bEGF involves protein kinase C delta. Biochem J， 2000， 352（15）: 175-182.
出所有vh；ii組微量取樣50 l，連續取15次；iii組左眼一次取樣。右眼微量重復取樣
。iv組雙眼第1次微量取樣．剩余一次
取出。檢測ca2+cl 、l(+、na 和p等含量，數據統計分析。結果 iii組左右眼、(iv)組先后兩次取樣配對t檢驗無差異(p>0
．05)，
各組微量取樣樣本的變異系數、雙眼差較小。結論 微量取樣的操作影響較小、穩定性和重復性好
． 更適合法醫學研究和應
用。
【關鍵詞】尸體化學；玻璃體液：取樣方法：比較
【中圖分類號】d919．1
【文獻標識碼】a
【文章編號】1007—9297(20__)03—0208—03
a comparison study of vitreous humor micro-sam pling and wholly sam pling on rabbits． zha ng yu—zhuj，w a ng lan2．3．
liu l ，(department offorensic me dicine，ton#ji medical college ofhuazhong university ofscience arm techno ，w han
430030,chian)
[abstract]objective to make a comparative study of wholly sampling and micro-sampling of vitreous humor(vh)．
methods
【作者簡介】戰玉祝(1968一)，男，漢族，山東莒南縣人，醫學學士，副主任法醫師
， 研究方向：臨床法醫學中的視覺、聽覺的電生理研究以
及法醫病理的死亡時間研究；tel~+86—531—86323203；e-mail：james6803@21cn．com
【通信作者1劉良(1960一)，男，漢族，山東沂水人，教授，博士生導師，主要從事法醫病理學教學
、研究及檢案。
法律與醫學雜志20__年第13卷(第3期)
thirty—six rabbits were divided into four groups，each of which contains nine．all were sampled at 12h postmortem．group 1 were
wholly extracted． group i1 were subjected to multiple sampling． of group iii， all left eyes were wholly sampled and all right eyes
were micro-sampled．all eyes of group iv were micro—sampled at first and all the left were wholy sampled．concentrations of calcium，
chloride，potassium，sodium and phosphorus were detected and statistically analyzed．results th ere are no significan t difference
between wholly sampling and micro-sampling of the pair-matched t—test of between-eyes in group iii and the twice sanipiing
in group iv．of micro—sam pling，the variations of the both-eyes and coeficient of variation were smaller than those of whony
sam pling． conclusion th e multi-micro-sam pling operation makes much less distort on vh， and is more stab le and repeatable，
which is promising for forensic vh study an d examination．
【key words l postmortem chemistry；vitreous humog sampling methodology；comparison study
取樣方法對玻璃體液(vitreous humor，vh)研究
有重要意義，[11傳統采用一次取樣vh，近年有研究使
用了微量取樣。迄今未見兩取樣方法比較研究，本實
驗通過一次取樣與微量取樣的比較． 旨在為vh研究
選擇取樣方法。
材料與方法
一
、實驗動物及分組取材
健康家兔36只，雌雄混用，體重1．9～2．5 ，由華
中科技大學同濟醫學院實驗動物中心提供。耳緣靜脈
空氣栓塞處死，置于4～7℃恒溫箱，隨機分為4組(每
組9只)，于死后12h取樣：i組根據coe推薦的方法，
用20g針頭5 iill注射器自外眥、角膜緣外約2 mm
處緩慢進針，瞳孔觀察針頭位于中央時緩慢抽出所有
vh，搖勻后移液50 l與去離子水1：4稀釋，編號入
ep管、-25℃凍存。ii組微量重復取樣：用20 g留置
針，入針后固定針頭，用1 ml注射器緩慢抽吸、移液
50 l，重復取樣15次，其余處置同i組。iii組左眼一
次取樣，同i組，右眼微量重復取樣同ii組。iv組雙眼
微量取樣1次，操作同ii組；換5 iid注射器一次取出
剩余所有vh，同i組。
二、檢測
同日檢測i組、iv組1、2次取樣和iii組左眼樣
本，ii組和iii組右眼第1?5 8 15次取樣樣本：37 ci=
水浴解凍，美國abboty aeroset 20__全自動生化分
析儀檢測ca2+、cl一、i<+、na+和p濃度。檢測3次，取平均
值。
三、統計分析
檢測數據根據參考文獻『31，采用excel和spss 12．0
分析軟件進行統計分析：計算各組變異系數，ii組進行
方差分析，iii組左右眼配對t檢驗，iv組1，2次取樣
配對t檢驗，分別計算iv組1，2次取樣雙眼濃度差與
雙眼均值的比。
結果
實驗所得結果及統計處理情況見表1、表2、表3。
表1各組變異系數(cv 。％)
table1 coeficient of variation in group i，ii，iii and iv (cv，％)
表2 ii組方差分析結果 值)
table2 variance analysis of group ii(p value)
表3 iv組雙眼差(絕對值)與雙眼均值的平均比(％)
table 3 ratio of average vanations to means in betweeneyes
of group iv(％)
討論
一
、取樣方法與變異程度
重復微量取樣方差分析提示總體vh樣本物質含
量無顯著差異(表2)，iii組和iv組一次取樣與微量取
樣的t檢驗無差異(p>0．05)，因此兩取樣方法獲得的
樣本總體無差異。但是，一次取樣的彌散程度大于微
量取樣(表1)，這印證了coe關于“取樣方法不當可造
成vh含量分散”的觀點。這也反應在雙眼濃度差上．
微量取樣的雙眼差較小、一次取樣較大(表3)。
結果與有關報道都相吻合：一次取樣研究報道的
· 210 ·
vh濃度變異程度和雙眼問差異較大， 而微量取樣研
究所報道的差異則往往較小。[7-91結合前期研究，[11分
析認為取樣方法是造成差異的原因。物質在vh、血液
和組織中含量不同， 取樣操作不當引起組織挫碎或污
染改變了vh樣本含量。coe方法的缺點之一是“盡量
取出所有vh”不好控制．實際操作時容易抽出鄰近組
織(如視網膜)，造成組分(如vh鉀)含量的人為改變。
tagliaro[91也認為微量取樣對眼球內壁組織的作用較
?。僮饕鸬膿p傷和組分改變也較小，取得的樣本
更好。
二、微量取樣的法醫學意義
微量取樣操作方法的文獻少見，設計微量取樣操
作時參考了coe方法的基本步驟。為方便多次取材、
減少進針次數、保持針頭位置和盡量減少污染等，采
用了留置針固定后定量(微量)移液的取材方法。
tagliaro等[91 4次取樣50 lvh獲得了較好的死亡時
間推斷精度，rognum等[111、poulsen等[121和bocaz—ben
eventi等【8】也采用微量取樣的方法，并稱死亡時間95％
預測區間更好。結合本實驗結果。作者認為這與微量
取樣的變異較小有關。微量取樣所體現的較小的雙眼
差，也更符合實際。111因此微量取樣采集樣本具有良好
的代表性，穩定性和重復性更好，也容易控制操作，更
適宜于vh的法醫學研究與應用
綜上所述，微量取樣與一次取樣總體無差別，但
不同取樣操作可以造成樣本均數變異系數的不同．比
較而言，微量取樣的彌散程度較小，變異程度和雙眼
差較小。微量取樣操作對樣本的影響較小，其穩定性
和重復性較好，更適合法醫學vh研究應用
參考文獻
『11汪嵐，戰玉祝，劉茜，等．家免死后玻璃體液離子濃度的微量重復取樣
法律與醫學雜志20__年第13卷(第3期)
法[j】．中國法醫學雜志，20__，21(3)5～7
[2】coe ji．postmortem chemistry update．emphasis on forensic application
[j1．am j forensic med pathol，1993．14(2)：91～117
[3】余松林．醫學統計學．北京：人民衛生出版禮，20__．40~41，44-56，l18-
129
[4】madea b，henssge c，honig w，et a1．references for determining the
time of death by potassium in vitreous humor[jll forensic sci int，
l 989．40(3)：23 1-243
[5】pounder dj，carson do，johnston k，et a1．electrolyte concentration
differences between left and right vitreous humor samples[j]．j foren—
sic sci，1998，43(3)：604-607
[6】gardiner ee，newberry rc，keng jy．postmortem time and storage
temperature affect the concentrations of hypoxanthine， other purines，
pyrimidines，and nucleosides in avian and porcine vitreous humor[j]．
pediatr res，1989，26(6)：639-642
[7】gardiner ee，newberry rc，keng jy．postmortem time and storage
temperature affect the concentrations of hypoxanthine， other purines，
pyrimidines，and nucleosides in avian and porcine vitreous humor[j]．
pediatr res，1989，26(6)：639-642
[8]bocaz—beneventi g，tagliaro f，bortolotti f，et a1．capillary zone elec—
trophoresis and artificial neural networks for estimation of the post—
mortem interval using electrolytes measurements in human vitreous hu—
mour[j]．int j legal med，20__，116(1)：5-11
[9】tagliaro f，bortolotti f，manetto g，et a1．potassium concentration differences
in the vitreous humour from the two eyes revisited by micro．
analysis with capillary electmph0resis[j1．j chromatogr a，20__，924
f1-2)：493-498
[1o]鄭建中．眼的生化概要[m]．北京：人民衛生出版禮，1991．111-128
[11】rognum to，hauge s，oyasaeter s，et a1．a new biochemical method
for estimation of postmortem time[j]．forensic sci，1991，51(1)：139～
146
[12】poulsen jp，oyasaeter s，sanderud j，e t a1．hypoxanthine，xanthine，
and uric acid concentrations in the cerebrospinal fluid，plasma
， an d