序言：寫作是分享個人見解和探索未知領域的橋梁，我們為您精選了8篇的減肥健身計劃樣本，期待這些樣本能夠為您提供豐富的參考和啟發，請盡情閱讀。

第1篇

【關鍵詞】 水飛薊素 腎小管間質纖維化 腎小管上皮-間質轉分化 轉化生長因子-β1

【Abstract】 Objective To explore the effect of silymarin on epithelial-mesenchymal transition (EMT) in rats with tubulointerstitial fibrosis induced unilateral ureteral obstruction. Methods 56 Sprague-Dawley rats were randomly pided into three groups: operated group(n=24)， silymarin treated group（n=24）and sham-operated group(n=8).Renal tubulointerstitial fibrosis model was established via unilateral ureteral obstruction(UUO). In operated group and treated group， eight rats were killed at the 7d， 14d and 21d after operation to examine the histological changes of renal tissue， but all 8 rats in sham-operated group were only killed at 21d. Histological changes were observed in tubulointerstitial injury under microscope.The expression of transforming growth factor- beta1（TGF-β1）and α-smooth muscle action(α-SMA) in renal tissue were determined with immunohistochemical method， respectively. Results Renal interstitium injury was seen in operated group and treated group at day 7，and became aggravating after day 7. The degree of renal tubulointerstitial fibrosis in rats from treated group was lighter than that of operated group at day 7， 14， 21(P

【Key words】 Silymarin tubulointerstitial fibrosis epithelial- mesenchymal transition transforming growth factor- beta1

腎小管上皮損傷引起小管上皮-肌成纖維細胞轉分化（EMT）在腎間質纖維化進程中發揮重要作用。這個過程受許多因素影響，其發展機制涉及許多方面。近年來研究表明轉化生長因子-β1（TGF -β1）在EMT進程中具有重要的促進作用[1]。本文旨在探討應用水飛薊素能否防止腎小管間質纖維化及可能機制。現報道如下:

1 材料與方法

1.1 動物模型及分組

選用3月齡SD大鼠56只，體重200～250g，購自新鄉醫學院動物中心。大鼠適應環境1周后，隨機分為：梗阻組（24只）、治療組（24只）、假手術組（8只）。大鼠行氯胺酮50mg/kg麻醉，取左旁正中切口剪開腹壁，以4號手術線將左輸尿管近端兩處結扎。假手術組同樣處理但不結扎。其中治療組于術前30分鐘開始給予水飛薊素30mg/kg灌胃，每日一次；假手術組和梗阻組給予等量生理鹽水灌胃處理。UUO大鼠于術后第7天、14天、21天隨機收獲8只，假手術組于第21天一次處死。取腎臟，10％多聚甲醛固定。光鏡下觀察腎組織的病理變化和免疫組織化學法檢測腎臟TGF-β1及α-SMA的表達情況。實驗過程中梗阻組第14天、21天時間點各死亡大鼠1只。

1.2 腎臟組織病理

腎組織切片進行HE染色和Masson染色，光鏡下觀察。在IDA-2000高清晰度數碼纖維圖像分析系統下計算腎小管間質纖維化相對面積。高倍鏡（×200）下每張切片隨機選取10個不重疊視野測定小管間質纖維化面積與同視野小管間質總面積的百分比，進行半定量評分[2]，取其平均積分為每張切片評分。評分標準：0分：無病變；1分：50％。

1.3 免疫組化

采用SABC法檢測腎組織中的TGF-β1和α-SMA，操作步驟按SABC試劑盒說明書進行。光鏡下組織切片呈棕黃色顆粒性沉積區域為陽性染色部位。高倍鏡（×200）下在每張不包含腎小球和血管的腎小管間質區域隨機選取10個不重疊的視野，應用IDA-2000高清晰度數碼圖像分析系統進行圖像采集，經灰度變換將陽性染色區域面積與該視野總面積百分比，計算平均值作為該樣本的百分比值。

1.4 統計學處理

各組數據均采用均數±標準差（

）表達，組間差異采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD檢驗法。由SPSS11.5統計軟件進行統計學處理。

2 結果

2.1 腎臟組織病理改變

光鏡下假手術組大鼠腎組織無病理改變。UUO術后梗阻組和治療組大鼠腎臟病理改變均明顯加重趨勢。實驗第7天時，梗阻組和治療組大鼠腎間質大量炎癥細胞浸潤、水腫，腎小管明顯擴張，部分小管內見大量細胞管型，腎小管上皮細胞胞漿疏松、濁腫和空泡變性。14天時，2組大鼠腎間質彌漫性炎癥細胞浸潤，間質面積進一步增寬，腎小管明顯擴張，部分小管內仍見大量細胞管型，腎小管上皮細胞腫脹、空泡變性，間質出現輕度纖維化。21天時，2組病變繼續加重，腎間質炎細胞浸潤減少，大部分腎小管脫落壞死、萎縮、消失，殘余腎小管明顯擴張，上皮腫脹，空泡變性， 間質纖維化明顯。治療組各觀察時間點腎臟病理變化明顯較梗阻組減輕（P

2.2 腎組織免疫組化變化

假手術組腎組織微量表達TGF-β1，主要位于腎小球系膜和上皮細胞，小管主要表達于遠曲小管;梗阻組和治療組腎組織表達TGF-β1隨病情進展而逐漸增強，遍布皮髄質損傷的腎小管，除腎小管上皮細胞有陽性表達外，增殖的單核巨噬細胞亦有表達。各觀察時間點治療組均較梗阻組減少(P

假手術組以血管作為自身陽性內參照，腎小球、腎小管和間質細胞均未α-SMA表達。UUO大鼠術后第7天時腎間質既有大量表達，14天時表達顯著增加，陽性信號彌漫分布，高峰持續至21天實驗結束。各觀察時間點治療組腎臟組織均較梗阻組減少(P

2.3 相關性分析 TGF-β1表達量與腎小管間質損傷評分、α-SMA表達量均呈正相關，相關系數r=0.914、0.971，P

3 討論

單側輸尿管梗阻（UUO）誘導腎小管間質纖維化模型主要造成腎小管損傷，伴有炎癥細胞浸潤，并在較短時間內發展為小管間質纖維化，是目前研究腎小管間質損傷較理想的模型之一[3]。本文采用UUO大鼠模型中的梗阻腎臟損害以小管間質為主，伴有較多的炎癥細胞浸潤及進行性纖維化，符合UUO模型的一般特點，表明動物模型的構建是成功的。

水飛薊素是從水飛薊植物提取的混合物，是一種黃酮醇類化合物，主要含水飛薊賓、水飛薊寧、水飛薊醇等。水飛薊素作為一種傳統藥物廣泛用于防治肝臟纖維化。它主要通過下調TGF-β1在肝內的表達，改變肝枯否細胞的功能，抑制炎癥反應，有效阻止肝纖維化[4]。目前研究發現腎小管間質纖維化與肝纖維化的機制相同。那么，水飛薊素是否也能延緩腎小管間質纖維化呢？本實驗研究結果顯示：同梗阻組相比， 治療組各觀察時間點腎臟病理變化明顯減輕，腎小管間質纖維化程度亦減輕。提示水飛薊素可有效減輕腎小管間質纖維化。

腎小管間質纖維化（TIF）幾乎是所有慢性腎臟疾病進行性發展的共同通路，是導致終末期腎病(ESRD)的主要病理基礎[5]。腎小管間質纖維化確切機制目前尚不清楚，其中一個重要機制就是肌成纖維細胞(Myof)增多及活化。Myof 是間質中合成細胞外基質（ECM）的主要細胞，而細胞外基質的增多直接導致了TIF的進行性發展。目前Myof的來源還不完全明確，近年研究發現除了由成纖維細胞活化而來，還有相當一部分來源于腎小管上皮細胞[6]，有學者報告在腎纖維化的發生過程中，36％的新增纖維細胞來源于腎小管上皮細胞轉分化[7]。α-SMA是MyoF的重要標志，可以用來觀測腎臟損傷時間質纖維化的病理進程[8]。本實驗研究發現，假手術組α-SMA僅表達于血管平滑肌肌層，UUO各組大鼠腎組織表達的α-SMA隨病情進展而持續升高。梗阻組明顯高于治療組（P

參 考 文 獻

[1] Stahl PJ， Felsen D. Transforming growth factor-beta， basement membrane， and epithelial-mesenchymal transdifferentiation: implications for fibrosis in kidney disease. Am J Pathol ， 2001，159: 1187-92.

[2] Mezzano SA， Droguett MA， Burgos ME， et al. Overexpression of chemokines fibrogenetic cytokines and myofibroblasts in human membranous nephropathy. Kidney Int 2000， 57:147-58.

[3] Klahr S， Morrissey J.Obstructive nephropathy and renal fibrosis.Am J Physiol Renal Physiol， 2002， 283(5):F861-75.Review.

[4] Jeong DH， Lee GP， Jeong WI， et al. Alterations of mast cells and TGF-beta1 on the silymarin treatment for CCl4-induced hepatic fibrosis.World J Gastroenterol. 2005， 11(8):1141-8.

[5] Gerth JH， Kriegsmann J， Trinh TT， et al. Induction of p27KIP1 after unilateral ureteral obstruction is independent of angiotensinⅡ. KidneyInt， 2002， 61(1):68-79.

[6] Liu YH. Epithelial to mesenchymal transition in renal fibrogenesis: pathologic significance， molecular mechanism， and therapeutic intervention. J Am Soc Nephrol， 2004， 15(1): 1-12.

[7] 李慧凜，周秋根，鄭法雷.腎小管上皮細胞轉分化的概念與病理過程。世界醫學雜志，2004，8（1）：34－35.

第2篇

1 非現場審計的作用及特點

(1) 提高了審計及時性。非現場審計借助計算機和網絡系統，可以實時獲取業務系統有效的數據信息，通過設置預警標準能夠做到實時動態監測，實現對風險的早期控制，為管理層提供預警信號。為現場審計提供資料和線索，最大限度地提高審計工作的效率和質量，為領導決策提供支持。

(2) 拓寬了審計覆蓋面。建設銀行近年來資產規模增長迅速，新的金融產品和服務不斷推出，業務的復雜程度大大提高，使審計的復雜程度也相應提高，審覆蓋面廣度加大。在現有審計資源的條件下，單純依靠傳統的審計方式和手工作業模式難以保障審計監督所必須達到的廣度和深度。而非現場審計依托高科技手段，可以遠程調集所屬機構的有關業務數據并進行監測，有助于全面把握分支機構和各項業務的風險狀況。

(3) 降低審計成本，提高審計質量和效率。一是節約審計成本。非現場審計模式下，審計組除了必要的現場調查和現場溝通外，可以大大減少審計人力費用、差旅費用和時間費用。二是減少了調閱資料時間。非現場審計模式下，審計數據的采集主要通過固定的審計數據采集接口來獲得，避免了現場審計中依賴被審計單位提供數據，使內部審計具有前所未有的主動性和靈活性。三是提高審計效率，增加審計價值。非現場審計是從定量分析到定性分析的過程，分析性復核方法貫穿于非現場審計的全過程，增強了審計人員的理性思維，可以避免重復勞動和無效勞動，規避審計風險，提高審計質量，使現場審計更具針對性，并且可以有效地解決審計資源不足與審計任務繁重的矛盾。

2 目前商業銀行開展非現場審計存在的問題

目前，商業銀行內部審計方式仍然是以現場審計為主，而非現場審計的手段沒有得到充分的發揮，不能滿足業務發展的需要。信息化、網絡化和專業技術化程度依然偏低，非現場審計發展存在一些薄弱環節，主要表現在：

(1) 未建立起一套科學、完整的非現場審計管理辦法和操作規程。進一步推動非現場審計工作尚未進入系統性規劃階段，如在非現場審計發展推動模式上缺少完整的規劃、目標和具體措施；非現場審計推進缺少組織保障，沒有明確的職責分工，缺少科學的領導、決策和協調；非現場審計的制度規章、操作流程尚屬空白。

(2) 熟悉非現場審計技術的人員嚴重不足，致使非現場技術應用程度不高。非現場審計系統對使用人員的綜合素質要求較高（操作處于半編程狀態），全面系統掌握非現場審計技術的人員匱乏，僅有少數審計人員熟悉數據源結構，系統操作熟練，能夠編制審計模型，這些同志一般都有較深的技術背景（原科技人員）。大多數的審計專業人員尚不能熟練運用非現場審計技術。非現場審計技術本應是全體審計人員的必備工具，僅有少數人掌握，有違引進非現場審計技術的初衷。

(3) 非現場審計僅作為現場審計的輔助手段，仍然是在非現場審計分析初步篩選疑點的基礎上確定抽樣樣本后到現場查證確認的模式。非現場審計技術應用未能有效減少審計項目所需的審計資源量，同時，大量的現場審計作業也勢必對業務經營造成不利的影響。

3 商業銀行如何有效拓展非現場審計的途徑

(1) 健全管理制度，落實發展目標。提高認識，落實發展目標，制定整體規劃，建立健全非現場審計制度，保證非現場審計有章可循，保證數據的收集、加工、分析、報告和處理有條不紊，保證所有的現場審計建立在非現場審計的基礎上。

第3篇

【摘要】 目的: 觀察Smad6和Smad7基因能否抑制TGFβ誘導腎小管上皮間充質轉分化。方法: 構建產生表達Smad6和Smad7基因的無輔毒腺相關病毒載體， 再將病毒顆粒分別轉染入人腎小管上皮細胞（HKC）， 細胞隨機分為正常對照、 TGFβ1組、 Smad7 組、 LacZ組、 TGFβ1+Smad7或Smad6組、 TGFβ1＋LacZ組。10 μg/L TGFβ1添加入培養液孵育15、 30、 60、 120 min和3 d。Western blot測定TGFβ1和Smad6或Smad7基因轉染對細胞pSmad2、 Ecadherin、 αsmooth muscle actin（αSMA）表達的影響， ELISA法測定培養上清羥脯氨酸的含量的變化， 倒置顯微鏡觀察細胞形態變化。結果: 與未加TGFβ1細胞相比， 添加TGFβ1后15、 30、 60、 120 min胞內Smad2磷酸化水平明顯增加， 30 min時表現最大。10 μg/L TGFβ1與HKC孵育72 h后， 細胞αSMA和羥脯氨酸量合成增加， Ecadherin表達減少; 細胞形態變長， 呈紡錘狀細胞， 失去鵝卵石樣的形狀。Smad7基因轉染可抑制TGFβ1誘導Smad2磷酸化， 抑制細胞αSMA和羥脯氨酸合成， 增加Ecadherin表達， 維持培養細胞的上皮樣形態， 相反， Smad6沒有這樣的作用。結論: Smad7而不是Smad6基因轉染能抑制TGFβ1誘導腎小管上皮間充質轉分化， 這些作用可能與Smad7阻斷Smad2磷酸化有關。

【關鍵詞】 Smad7; Smad6; 上皮間充質轉分化; TGFβ; 基因治療

腎小管上皮間充質轉分化（epithelial mesenchymal transition， EMT）是腎小管間質纖維化(Tubulointerstitial fibrosis， TIF)發生的重要原因之一， 超過1/3的間質成纖維細胞來源于EMT， 因此， 尋找減緩EMT的方法是TIF研究的重點［1， 2］。TGFβ是EMT的重要誘導劑之一， 減少其對小管上皮的影響可能對TIF治療有幫助。Smad6和Smad7蛋白是TGFβ家族細胞內信號轉導的負調控蛋白（InhibitorySmads， ISmad）［3］。ISmads能與活化的TGFβⅠ型受體牢固結合， 阻止Smad2和Smad3磷酸化， 未磷酸化的Smad2和Smad3不能形成轉錄復合物進入核內， 從而阻斷了TGFβ對靶基因的轉錄。我們以往的研究發現Smad6和Smad7表達下調可能是TGFβ 高表達致TIF的主要原因， 但提高它們的表達能否抑制TGFβ誘導的EMT尚不清楚［4］。為此， 我們采用腺相關病毒將Smad6和Smad7基因分別轉染入人腎小管細胞中， 觀察其能否抑制TGFβ誘導的EMT， 并分析其細胞內信號轉導機制。

1 材料和方法

1.1 材料 限制性核酸內切酶BamH I、 Xho I及T4連接酶， 均購自TaKaRa公司。Wizard PlusSV Minipreps DNA Purification System和Wizard PureFectionPlasmid DNA Purification System質粒提取試劑盒和膠回收試劑盒， 均購自Promega公司。TGFβ1和兔抗Flag M2抗體購自Sigma公司， 兔抗phosphoSmad2抗體購自upstate biotechnology公司， 兔抗αSMA抗體購自Dako公司， 兔抗Ecadherin抗體購自B＆D公司。AAV HelperFree System（pAAVMCS vector、 pAAVLacZ vector、 pAAVRC plasmid、 pHelper plasmid）和XL10Gold感受態細菌， 購自Stratagene公司。E.coli DH5α由本校分子遺傳教研室饋贈。含全長Smad6/Flag和Smad7/Flag融合基因表達質粒， 由瑞典Serhiy Souchelnytskyi博士惠贈。HEK 293和HKC細胞購自美國ATCC。

1.2 方法

1.2.1 Smad6和Smad7 AAV的產生及鑒定 首先將Smad6/Flag和Smad7/Fla段從質粒pcDNA3中用EcoR I/BamH I雙酶切出， 再克隆到pAAVMCS vector質粒的多克隆位點， 正式命名為pAAVSmad6/Flag和pAAVSmad7/Flag質粒。按Stratagene公司AAV HelperFree System轉染試劑盒以磷酸鈣沉淀的方法產生Smad6和Smad7 AAV。以1 mL病毒儲存液感染HKC細胞48 h后表達轉移基因陽性細胞數（SABC組化）來計算。

1.2.2 HKC細胞的培養及實驗分組 HKC細胞用含100 mL/L的胎牛血清， 100 U/mL青霉素、 100 mg/L鏈霉素的RPMI1640培養液傳代培養， 培養條件為37℃、 50 mL/L CO2。細胞隨機分為正常對照、 TGFβ1組、 Smad7 組、 LacZ組、 TGFβ1+Smad7或Smad6組、 TGFβ1＋LacZ組。實驗分三步驟進行， 第一步觀察10 μg/L TGFβ1對HKC細胞磷酸化Smad2水平的影響， 時相點設為0、 15、 30、 60、 120 min; 第二步觀察不同AAV滴度ISmad轉染HKC對TGFβ1誘導上皮間充質轉分化的影響， 時相點為72 h。

1.2.3 Western bot 分析 細胞經PBS沖洗后， 加入RIPA裂解液（10 g/L Nonidet P40， 50 mmol/L TrisHCl， 150 mmol/L NaCl， 2 mmol/L EDTA， 1 mL/L SDS， 10 mL/L TritonX100， PMSF 50 mg/L， Leuptin 5 mg/L）30 min勻漿提取蛋白， 4℃ 12 000 g離心20 min， 取上清以Micro BCA protein Kit 測定蛋白質含量。取等量蛋白質經煮沸5 min后行SDSPAGE垂直凝膠電泳， 電轉移蛋白質到PVDF膜上， 膜在50 mL/L牛血清白蛋白TBST液（10 mmol/L Tris·HCl， 150 mmol/L NaCI， 0.5 mL/L Tween20， pH8.0）封閉， 37℃室溫1 h， TBST洗膜后分別與不同一抗AntiphosphoSmad2（1∶1 000）、 Ecadherin（1∶1 000）， αsmooth muscle actin（1∶1 000）、 β actin（1∶1 000）抗體孵育37℃， 2 h， 依次再用生物素標記的二抗雜交和辣根酶標記鏈酶卵白素液孵育， 37℃， 1 h， TBST洗膜后在暗室中加ECL發光試劑， X光膠片下曝光， 常規方法顯影、 定影， 直至顯影出電泳帶。使用Bio Rad 5000圖像系統采集電泳圖像， Verso Doc軟件檢測蛋白質條帶的吸光度（A）值， 以β actin為內參照進行半定量分析。

1.2.4 培養上清中羥脯氨酸的含量 嚴格按試劑盒說明書方法操作， 用M550型酶標儀在550 nm處檢測A值， 通過下列公式計算樣品中羥脯氨酸含量。樣品中羥脯氨酸濃度(mg/L)=(測定管A值-空白管A值)/(標準管A值-空白管A值)。

1.2.5 培養細胞形態的變化 觀察正常對照組， TGFβ1組， TGFβ1+Smad7組， TGFβ1+Smad7組細胞的形態變化。

1.2.6 統計學分析 實驗數據以x±s表示， 用SPSS13.0統計軟件進行組間方差分析， P

2 結果

2.1 重組AAV的產生及病毒滴度 分別取10 μg的質粒pAAVLacZ或pAAVSmad6/Flag或pAAVSmad7/Flag和各10 μg的 pAAVRC和pHelper質粒經磷酸鈣沉淀法共轉染HEK293細胞后2～3 d。pAAVLacZ轉染組經原位βGalactosidase 染色細胞后可見細胞呈藍色。轉染Smad6和Smad7 AAV的細胞， 約90％以上的腎小管上皮細胞可有效表達Smad6和Smad7蛋白， 染色后可見陽性細胞呈棕色。平均病毒病毒滴度分別為rAAVlacZ 2×1010 IU/mL， pAAVSmad6/Flag 3×1010 IU/mL， pAAV Smad7/Flag 3×1010IU/mL（圖1）。

2.2 TGFβ1和ISmad基因轉染對pSmad2的表達的影響 Western blot結果顯示， HKC細胞和TGFβ1孵育0、 15、 30、 60、 120 min后， 細胞pSmad2水平增加， 其作用在30～60 min時表現最大， 表明TGFβ1可誘導細胞內Smad2磷酸化（圖2）。

1×1010滴度Smad7基因轉染HKC后30 min， Western blot結果顯示Smad7基因轉染可抑制TGFβ1誘導的Smad2磷酸化水平， 而Smad6基因轉染不能抑制TGFβ1誘導的Smad2磷酸化（圖3、 4）。

2.3 ISmad基因轉染對TGFβ誘導腎小管上皮間充質轉分化的影響 Western結果顯示， 10 μg/L TGFβ1處理HKC細胞后72 h， 與正常對照組相比， 細胞αSMA表達增加， 而Ecadherin表達減少。與TGFβ1組相比， TGFβ1＋Smad7組細胞αSMA減少， Ecadherin表達明顯增加。TGFβ1＋Smad6組αSMA、 Ecadherin表達均無明顯變化， 表明Smad7基因轉染可拮抗TGFβ1誘導腎小管上皮間充質轉分化， 而Smad6沒有這樣的作用(圖5～8)。

2.4 ISmad基因轉染對培養上清中羥脯氨酸的含量的影響 ELISA結果顯示， 10 μg/L TGFβ1處理HKC細胞后72 h， 與正常對照組（3.37±0.41)mg/L相比， 細胞培養上清中羥脯氨酸的含量（6.12±0.55) mg/L明顯增加。與TGFβ1組相比， TGFβ1＋Smad7組細胞上清羥脯氨酸的含量（4.15±0.46)mg/L明顯降低， 而Smad6組（6.15±0.56)mg/L無明顯變化， 表明Smad7基因轉染可拮抗TGFβ1誘導腎小管羥脯氨酸的合成， 而Smad6沒有這樣的作用。

2.5 培養細胞形態的變化 10 μg/L TGFβ1作用72 h后細胞形態變長， 呈紡錘狀細胞， 失去鵝卵石樣的形狀， 表明腎小管細胞向肌纖維細胞形狀轉變。與TGFβ1組相比， TGFβ1＋Smad7組細胞能維持上皮樣形態， 而TGFβ1＋Smad6組細胞不能維持上皮樣形態， 呈紡錘狀細胞(圖9)。

3 討論

TIF是各種腎臟疾病進展至腎衰竭的共同通路， 減緩TIF的進展一直是慢性腎病治療的重點之一［5］。TIF主要表現為小管細胞消失和間質細胞外基質（ECM）的堆積。ECM主要由纖維連接蛋白和膠原蛋白組成。盡管腎小管細胞能合成部分ECM， 但肌成纖維細胞是ECM的主要來源。研究表明， 肌成纖維細胞的來源可能有: ①腎間質固有成纖維細胞; ②腎髓源性干細胞; ③EMT， 其中EMT是腎臟纖維化中肌成纖維細胞的主要來源， Iwano等［2］報道大約36％的肌成纖維細胞來源于腎臟局部EMT。因此， 探討EMT成因和阻斷措施對減緩TIF的進展具有重要意義。本研究結果顯示， HKC細胞和TGFβ1孵育0、 15、 30、 60、 120 min后， 細胞pSmad2水平增加， 說明TGFβ通過Smad2的磷酸化實現其胞內信號轉導。Smads蛋白是TGFβ細胞內的主要信號轉導蛋白， TGFβ首先與其II型受體結合， 活化的II型受體蛋白激酶使I型受體磷酸化， 活化的I型受體蛋白激酶作用于Rsmads(Smad2， 3)， 使其磷酸化， 隨后Smad2， 3與4形成異源寡聚體復合物， 移入核內， 在核內其與目的基因啟動子區的Smads反應元件結合， 啟動基因轉錄， 包括膠原基因、 ISmad基因等。Ellis等［6］發現I， III 和V膠原基因均含有Smad2， 3， 4的結合位點。PAI1基因啟動子740和647位點存在有TGFβ反應元件， 活化的Smad形成的轉錄復合物與此元件結合后， 可增強PAI1基因的轉錄［7］， 由此影響纖溶酶原/纖溶酶的活性。Hu等［8］還證實alphaSMA基因的啟動子中含有二個Smad3反應區， Smad3可促進αSMA的表達， 因此阻抑受體活化的Smad(Smad2， 3)磷酸化， 是減弱TGFβ信號， 控制EMT的關鍵。Smad6和Smad7蛋白是TGFβ家族細胞內信號轉導的負調控蛋白。TGFβ活化I型受體同時也激活ISmad， Smad7通過與Smad2和Smad3競爭性結合I型受體， 抑制其磷酸化并干預核內功能性SmadDNA的形成［9］; 另一方面Smad7還可與smurfl/2結合， 通過泛素化途徑降解I型受體， 對TGFβ細胞內信號轉導進行負反饋調節［10］。Smad6主要負調控蛋白骨形態發生蛋白（BMP）和部分TGFβ的細胞內信號轉導［11］。既往我們建立單側輸尿管梗阻性腎病腎小管間質纖維化模型， 發現Smad6和Smad7表達下調可能是TGFβ 高表達致TIF的主要原因， 但提高它們的表達能否抑制TGFβ誘導的EMT尚不清楚。本研究結果顯示， Smad7基因轉染可抑制TGFβ1誘導Smad2磷酸化， 而Smad6基因轉染不能抑制TGFβ1誘導的Smad2磷酸化， 說明Smad2磷酸化只受Smad7調控。Smad6不具有這樣的作用， 我們分析這可能與Smad6主要影響Smad1和Smad5的磷酸化［12］， 參與調控BMP信號通路作用有關。Zhao等［13］發現Smad7而不是Smad6可抑制TGFβ誘導的胚胎肺的形態發生; HillKapturczak等［14］還證實Smad7而不是Smad6可抑制TGFβ對腎小管細胞血紅素加氧酶的抑制．因此， 控制Smad2的活化可能是Smad7減弱TGFβ信號的分子機制基礎。

從ECM產生這個角度來看， 激活產生ECM的效應細胞被認為是腎臟纖維化的核心。研究已經揭示肌成纖維細胞是ECM的主要來源， 腎臟纖維化中肌成纖維細胞的主要來源于EMT［2， 5］。腎小管發生EMT時主要表現以下特點: ①細胞極性消失; ②細胞Ecadherin表達受抑制和緊密連接消失; ③表達波形纖維蛋白; ④表達αSMA。其中Ecadherin是上皮細胞的標記分子， 對維持上皮細胞間緊密連接， 穩定上皮細胞表型具有重要的作用， αSMA是MFB的標記分子［15］。倒置顯微鏡觀察10 μg/L TGFβ1作用72 h后細胞形態變長， 呈紡錘狀細胞， 失去鵝卵石樣的形狀， 表明腎小管細胞向纖維細胞形狀轉變。Smad7基因轉染可抑制TGFβ1誘導的Ecadherin表達下降和αSMA表達增加， 降低培養上清中羥脯氨酸的含量， HKC能維持上皮樣形態， 向纖維細胞形狀轉變不明顯， 而Smad6轉染組不具有這樣的作用， 說明Smad7基因轉染可抑制TGFβ誘導的腎小管上皮細胞轉分化， 從而減少肌成纖維細胞的數目， 最終減輕腎小管間質纖維化。

總之， Smad7基因轉染可抑制TGFβ誘導的腎小管細胞上皮－間充質的轉分化， 其作用途徑可能是通過抑制Smad2磷酸化， 干預下游Smad介導的細胞內信號轉導， 維持Ecadherin表達， 減少αSMA表達， 降低細胞合成ECM蛋白有關， 而Smad6基因轉染不具有這樣的作用。

參考文獻

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第4篇

身高：160cm

之前體重：112斤

目前體重：98斤

減重歷時：30天

馬拉松式的8年戀愛終于有了功德圓滿的結果：2007年10月5號，我，不漂亮也不難看的傻女孩Elle就要嫁給馬志剛了！

從確定婚期那天開始，我便緊繃神經，全力以赴地應對婚期的大小瑣事，布置新房、挑選禮服與喜帖……忙得不亦樂乎。

還記得那天和志剛去試禮服，我相中了一件魚尾式白色紗裙，穿上后在鏡子前左右環顧，鏡中的自己仿若童話中美麗的人魚公主。回頭期待地看向志剛，等待著他的贊美。“嗯，好看！”我的心有點飄飄然，但誰知他又補了一句：“不過，要是能再瘦點就好了。”立時，我沮喪到極點。我知道志剛這么說是無意的，但還是深深地刺痛了我，從那一刻開始我痛下決心，一定要在婚前減掉身上多余的肉肉，讓穿上漂亮婚紗的自己成為志剛最引以為豪的美麗新娘。

8月26日，我開始了自己的目標型減肥計劃。

離婚期還有近10天，我的減肥計劃正好滿一個月，站在體重稱上看著指針穩穩地停在49kg處，我的欣喜難以言表，一個月來減肥的辛苦與忍耐都在這一刻化為烏有，我甚至能夠想象得出，在甩掉了身上足足14斤贅肉之后，再穿上那件漂亮的魚尾式婚紗的自己會是多么的婀娜。

幸福是要與朋友一起分享的，因此，我首先想到與我一樣艱難行走在減肥路上的姐妹。我要將自己成功減肥的心得告訴她們，讓她們也能和我一樣實現瘦身夢想。

總結這一個月的減肥經歷，我覺得有3點至關重要，有興趣就聽我慢慢說吧。

減肥關鍵1：飲食――少食多餐，均衡飲食

我曾經有過幾次減肥經歷，其中也有靠節食的，但由于克制力不夠，雖然體重有所減少，但很不穩定，多吃一點就會反彈；而且那段時間的體質很不好，臉色暗黃暗黃的，給人一副病怏怏的感覺。

減肥就是為了美，如果為“纖瘦美”而丟了“健康美”，豈不和扳苞谷的猴子沒什么兩樣？這樣一想，我便決定放棄。不過，那次經歷給了我一些提醒，讓我在開始這次減肥之前就對自己的飲食做了調整。

清晨：空腹喝一杯白開水或清水。

早餐：中式早餐以營養的湯、米飯、青菜為主，外加雞肉或魚肉；西式的則以全麥面包、脫脂牛奶、煎蛋（但不放鹽）為主，配以蘋果或西紅柿等。如此豐盛卻完全不用擔心致胖，唯一需注意的就是要保證一次食量不能太多，以免把胃撐大。

加餐：一般在10～11點之間，主要是吃水果，比如1個蘋果或桃子、香蕉等。我個人認為減肥期間營養一定要均衡，而且上午吃東西，身體吸收和消化能力都很強，新陳代謝速度快，不會囤積脂肪。

午餐：米飯和青菜。保持健康原則，吃飽但絕不吃撐。若在飯前半小時喝1大杯白開水，可避免午餐吃過量。

下午茶：一般1點上班時我會喝1杯濃濃的普洱茶，去脂兼提神；3點時我會喝1杯酸奶，健康養顏且利于消化，是不可或缺的下午茶；考慮到減肥的同時很可能會讓胸部也縮水，因此每天下午我還會喝1杯木瓜飲料，具體喝的時間不固定，但一定要在5點之前，以免多余熱量無法及時得到消耗。

晚餐：我一般很少吃。但如果要去健身，去之前我會喝1杯酸奶，再吃1個西紅柿或1根黃瓜，回來后我則會喝一些清淡的蔬菜湯。其實，晚餐的原則就是――吃得越早、越少會越好。謹記這一原則，并盡力遵守，你就會看到回報。

Point：想健康就要多喝水，但這一理論只適合白天。把人體1天所需的2～3升水全放在白天攝入，晚上8點之后就盡量不要喝水，要知道晚上喝太多水會導致身體浮腫，從而影響減重效果。

減肥關鍵2：運動――堅持就是勝利

我選擇去健身房做專業且有針對性的運動，以充分鍛煉全身每一個部位，如此瘦下來會比較均勻、有型。此外，健身房充滿激情的群體運動氛圍，能充分帶動人的運動興致，令人很輕松地燃燒掉更多脂肪。

狠下心花錢――

我先在一家條件不錯的健身中心辦了張年卡，費用總計4800元，之后又給自己買了套將近1000元的健身服，總計差不多是我年收入的1/10，對我來說算是大出血了，這么做只是希望代價不菲的健身卡和健身服能督促我堅持運動。聽朋友說，在昂貴的運動場所若自己不能堅持就會為花掉的錢倍感心疼，以此來達到運動目的。聽說這種方法百試不爽，再懶的女生都會堅持，總之我自己就是因心疼花掉的錢才堅持下來的，哈哈。

健身房甩脂先苦后甜――

每周我會去健身房3次，以快走和器械練習為主。

快走：我個人認為它是一項非常好且容易堅持下來運動。如果換成跑步，對我來說就有些難度，而且像跑步這種過于激烈的運動若一次持續過長時間，會對膝關節和腳踝造成強烈的沖擊。

每次快走我會堅持60～75分鐘，而為加大運動量以及增添樂趣，我會選擇性地變換快走節奏，前10～15分鐘以5公里/小時的速度走，接下來的15～20分鐘以6公里/小時的速度走，之后的20～30分鐘以6.5～7公里/小時的速度走，最后的10～15分鐘步率逐漸降低，以約4.5公里/小時的速度走，這樣有急有緩，運動起來不會覺得太累。此外，如果你喜歡跳舞，快走時還可踩著健身房里舞曲的鼓點，優美的身姿可會為你贏來不少帥哥的矚目。

器械練習：這種練習主要是針對手臂、腹部、腿部和臀部等重點部位，相對來說比較專業，運動時最好請健身教練有指對性地為你設計最佳的練習方式。我個人感覺，器械練習重量越輕越好，只要做的次數多一些就可以了。

跳操：這其實是最適合女性減肥的好運動，不過由于我去的那家健身房跳操班的人實在太多，我又天生不愛湊熱鬧，便只好放棄。

Point：不管選擇什么運動項目，最后都要做足拉伸運動，再做一定時間的按摩，尤其是腿部，它能幫助你保持優美的身體線條。

減肥關鍵3：心態――減肥是生活中最自然的一部分

“胖”不僅意味著體內污物排出不徹底、新陳代謝緩慢，同時還會給人以倦怠不精神的印象。年輕的身體應該是健康且充滿活力的，因此，選擇減肥不僅是一種積極面對生活的態度，更是追求健康與青春的本能需要。它不是否定原來的自己，而是要讓原來的自己更加完美。

第5篇

1、堅持跑步。由于飲食不規律，導致身體長胖，想快速減肥。最簡單也是最方便的一個方法就是跑步，由于每個人的身體體質不同，可以選擇慢跑，也可以選擇慢走，快走，總之需要意志堅定，每天去堅持，就會有很明顯的效果。

2、每天堅持做仰臥起坐。減肥，是一個很漫長的事，其實也是一步一步的發展的，需要人去堅持，才會有效果。仰臥起坐是最常見的一種鍛煉方式，簡單有效。我們可以早上起來，或者睡前，飯后一小時，堅持做上幾組仰臥起坐，每天能堅持養成鍛煉的好習慣，減肥就不是難事了。

3、堅持去健身房。相比較很多散練的運動減肥方法，可能效果不太明顯，這時候如果有一定的條件的話，可以選擇去專業的健身房，哪里有專業的器材，還有專業的教練，對于你個人的減肥，可以給出很好的計劃，能讓你快速減肥，達到好的效果。

4、堅持做平板支撐。減肥的方法有很多種，除了仰臥起坐，俯臥撐，平板支撐也是最常見的一種鍛煉方法，無需借助其他器材，只需要瑜伽墊，簡單方便。剛開始可以設定短一點的時間，后來可以慢慢加長訓練的時間，不斷地鍛煉自己，堅持下去，對減肥一定會有效果。

（來源：文章屋網 ）

第6篇

第1招：像寶寶一樣愛玩

寶寶們都喜歡在床上、地板上爬著到處轉，當他們爬行時，他們的腹部和背部肌肉在用勁，這些核心肌肉對干訓練他們爬行和坐立是非常重要的。媽媽們也要將注意力集中在這些肌肉上。 “訓練核心肌肉非常重要，但就像做伸展運動一樣。盡管效果不是十分明顯，但不要因為這樣就忽視它，強壯的核心肌肉可以讓你在日常活動中擁有更好的控制力和輔助力。”―位健身房高級私人教練這樣說。

這樣做同樣會使你變得更強壯，以便能參加更多的運動。寶寶在玩耍的時候，媽媽可以學著跟寶寶一起運動，跟寶寶一起玩捉迷藏，也可以自己做些簡單的健身操、瑜伽操等等。

第2招：像寶寶一樣吃

說到和寶寶一樣吃，我們大多數成人也許會不以為然，腦海里浮現的是寶寶吃東西時在頭發或者臉上都沾滿食物的畫面。實際上，像寶寶一樣吃飯也是減肥的重要因素。

①像寶寶一樣每隔3―4小時吃點小點心，可以使你保持充足的精力。美國體育醫學院的學者發現整天都在攝入食物的運動員的脂肪比那些在正統吃飯時間消耗他們所有卡路里的人更少。

②像寶寶一樣在飽了以后就停止進食，不管你面前還留對于小媽們來說，有什么比小寶寶胖乎乎的小臉蛋和肉嘟嘟的小胳膊小腿更讓人喜歡的呢!然而，對于自己身上的贅肉，媽媽們卻苦惱不已。兒科醫生說：寶寶開始學會爬行時，它的嬰兒肥就開始慢慢減少了。那么，他們的媽媽呢?因為懷孕生產而增力0的體重也會慢慢自然減少嗎?――答案是否定的。但，也許我們也可以從寶寶身上學幾招減肥秘技：著多少美食――這對于控制食量是非常值得借鑒的。

③像寶寶一樣選擇多樣化的食物。在你的食物里加入給寶寶吃的食物，比如說南瓜、青豆、牛肉、米飯、香蕉和梨等等。參與選擇寶寶食譜意味著你攝入了更多的水果和蔬菜，飲食也變得更健康。

第3招：像寶寶一樣睡

寶寶的睡眠時間大約在12-15個小時，這個時間對于我們成人來說是非常奢侈的。在你的減肥計劃中，充足的睡眠往往可能是被忽略的環節。最近的研究顯示：缺乏睡眠會影響人體的荷爾蒙水平，從而增加人體的饑餓感并減慢新陳代謝速度。所以，在你累了或者困了的時候，適當的休息是非常明智的選擇。

第4招：像寶寶一樣看電視

電視真的對你的寶寶有好處嗎?醫學研究表明：長時間看電視的寶寶可能導致體質指數增高。那么，對于喜愛看電視的媽媽來說，這又意味著什么呢?醫學研究者最近發現：看電視的時候，一個人的新陳代謝實際上比他在休息的時候要慢。那就意味著你睡覺時比你早起看早間節目能燃燒更多的卡路里。美國育兒專家建議寶寶的前兩年時間里最好沒有電視。也許媽媽也應該如此。

如果你已經打開了電視，那么轉個頭，看看你的寶寶，他是如何看電視的。寶寶在看有強節奏感音樂伴奏的節目時，會拍手、蹦跳或者跳舞。換句話說，看電視并不是讓你自己懶洋洋地窩在沙發里或者床上，而是把電視當作你保持運動的一種背景，你可以在家里的地板上散步，可以舉舉啞鈴或者做回你的老本行――家務活。

第5招：像寶寶一樣喝牛奶

寶寶最喜歡白色飲料了，不管它是配方奶粉、牛奶或者是來自媽媽的母乳，奶類食品可以給寶寶提供充足的鈣。同樣，媽媽每天也需要補充一定量的鈣，尤其是還處在哺乳期的媽媽。但是，媽媽們還是心存疑慮：奶制品能減肥嗎?答案是肯定的。

最近的研究已經顯示：含鈣量豐富的奶制品可以增強機體燃燒脂肪的能力，并加快新陳代謝。美國田納西州大學教授MICHAELB．ZEMEL博士研究發現：富含奶制品的飲食習慣，再加上適當的運動，可以加快減少體重的過程。ZEMEL博士的其中一項研究表明：經常食用低脂酸奶的人腹部減少的體重是不食用酸奶的人的3倍。

奶制品能減少腹部脂肪的確切原因仍待考證，但ZEMEL博士相信當人體攝入奶制品時，必定會發生某種荷爾蒙反應，導致腹部的脂肪細胞運動。所以，專家建議：當媽媽們一方面擔心她們的飲食習慣是否健康，另一方面又擔心她們的形體，她們要做的第一件事就是開始每天喝牛奶。

第6招：像寶寶一枯多多運動

盡管寶寶可能只有你膝蓋那么點高，但他們會有某些激烈運動，也就是說經常會有短時期的能量暴發，這對手媽媽的減肥計劃也有益處。研究表明短時間的激烈運動的效果和在健身房里泡上兩個小時的作用是一樣的。只要你的心跳達到每分鐘40－60下，就意味著你身體的脂肪在燃燒了。除此之外，即使你結束了某種激烈運動，你的身體也會繼續燃燒脂肪，這種現象我們稱之為后燃燒。

所以，媽媽們，每天都嘗試一種新的運動吧。去健身房的時候，可以不斷地更換你參力口的項目，從器械到健身操，從健身操到芭蕾，再從芭蕾舞回到器械運動，如此不斷的循環往復。當然，運動不僅僅只局限在健身房，帶上你的寶寶，推個小車逛超市、商場，空的時候自己跳躍幾下都是健康且經濟的選擇。

第7篇

一份新出爐的減重調查報告發現，81％的男性受訪者自覺減重有助體能表現，其中更有半數以上認為有助提高次數與腰肌力量。 女性受訪者則有72％認為減肥有助外在魅力，四成三表示有助次數、三成覺得有助。

一天當中，有N個會要開，哪里有時間安靜下來享受美味。

一般中午的時候，我都會在麥當勞、肯德基買個漢堡充饑。晚上，下班都很晚，路上包里隨時準備的小零食已經把我喂個半飽。回到家，豐盛的晚餐讓我食欲大開。這些天，我發現我的體重明顯上漲了，腰部贅肉已經現身了。我是該減肥了。

老公：任珂29歲部門主管老婆差不多，早餐對我來說就是一大杯果汁和一杯黑咖啡就OK了。辦公室的抽屜里的糖，餅干隨時防止肚子唱空城計。純凈水是我平時主要的飲料。

中午，我幾乎都是在寫字樓下的餐廳吃點快餐，無非都是米飯炒菜之類的東西，比較油膩。

由于老婆下班比較晚，為了等她共進晚餐，我通常在晚飯前會先吃點餅干或火腿腸，再喝點威士忌，以撫慰我的“五臟廟”。我們的晚餐是比較豐盛的，都是我們愛吃的紅燒排骨、水煮牛肉之類的菜。飯后，我倆還會邊看電視，邊吃點小零食。

常會喝一杯鮮果汁或者豆漿

由于中午時間比較緊張，午餐基本都是在飯館吃。那里的飯菜比較油膩，好像都是從油里泡出來似的。盡管我知道這對減肥很不利，可美味的誘惑實在太大了。我很喜歡吃水果，也喜歡吃零食，餅干、蜜餞、薯片……來者不拒。

我們倆決定一起減肥。等到目標一達成，我的第一件事，就是把不敢穿的緊身衣服一次買齊，出門秀身材。

這已經養成習慣了。

中午，會去同一家餐館用餐，吃一些蔬菜、肉類搭配均勻的工作餐。我不太喜歡吃水果。為了自己的健康，我打算減重5公斤。

雙人健身一起變瘦

兩個人一起健身，給你帶來的收獲遠遠超出你的想象!

首先，兩個愛侶一起瘦身會讓減肥不再是難以堅持的苦差事。兩個人可以相互鼓勵，相互督促，一方泄氣了，動搖了，另一方可以在一旁幫忙打氣。其次，有個人在旁邊看著，你的錯誤動作就會無處藏身，避免了很多“無用功”。兩人瘦身成功后，上街時的那份良好感覺是不言而喻的。減肥也和休閑一樣，兩個人總比一個人樂趣多。

第8篇

3年前，在一個朋友的鼓勵下，Natalie 走進了當地的健身房。在美國康乃狄克州斯坦福德的Sportsplex健身俱樂部，她報名參加了超級減肥項目，這是一個8周的密集減肥計劃，它包含為會員尋求甩掉贅肉的健康和營養方面的咨詢。

Gianesello說：“我很擔憂，自己并不是一個積極主動的人，更不是那種一下班就會去健身房的人。”雖然對她來說健身俱樂部中很多事物都是新鮮的，但Gianesello很快就適應了。“在那樣的環境中，與志同道合的人一起運動，我感到很舒服，”經過8周的超級減肥項目，她減掉了約14鎊，并在項目結束后向更高的目標前進——首先聘請私人教練為她定制一個健康規劃，然后報一個訓練營課程并在幾周內的工作之余完成它。“最終，我從169鎊減到129鎊，”Gianesello說道，“這不僅僅只是數字問題，我已經迷上了健身！”

興趣的吸引力

雖然成功減重，但是Gianesello對運動的熱誠并沒有減少。她的教練提醒她，個性能幫助她更快更好的成為一個健美教練。“我非常感激他的這番話，但我認為他只是在說笑而已。”她說道，“經過另外幾次訓練后，他讓我去教班上的一個學生。然而我發現他是對的：我喜歡當教練。”Gianesello開始為取得證書而奮斗。在此過程中，她學習了如何幫助別人保持健康這類非常寶貴的課程。她說道，“我曾經逃避參加那些集體健身課程，一走進教室，站在那些如電影中走出來的苗條女人旁邊，使我完全失去了自信心。”

正在她努力將自己的體形變得更完美時，她突然醒悟：“我意識到無論她們的體形如何，在上課時她們的注意力都完全集中在自己身上，這使我減少了很多壓力。”Gianesello也了解到緩慢而穩定的運動效果更佳。那些保持健身的人比剛剛開始的人更強壯，但這需要你投入時間，日復一日的練習，無論你的技巧是否純熟，都能獲得最大的收獲。她說，“作為一個教練，我見過各種運動程度的人，每個人都在努力達到自己最好狀態。”

他們都有一個共同點：對小小的額外鼓勵的感激。“最近，我在等待一個客戶展示她的課程，但是她遲到了，”Gianesello說道，“我打電話給她想知道發生了什么，結果她說她在家里，耽擱了。她說，‘你可以過來對我進行測試。我來不了了。’我說，‘不行，我這里的健身球、啞鈴和所有的東西，都準備好了。只要來半個小時就可以了。’”客戶勉強答應來上了一節30分鐘的課程。最終，她非常感激Gianesello堅持的勸說。“她承認，出門運動總比呆在家里吃垃圾食品、自暴自棄好得多。我喜歡這句，‘當然，你可以做到！’”

堅持到底：諷刺的是，雖然她已經是一個持照教練，要保持自己的健身水準卻比把它當成一種業余愛好更具困難。Gianesello說“我每天都過得很充實，上午9點我有一個客戶，11點又有另外一個。在兩個客戶之間，我會擠一點時間出來鍛煉一下。”她像激勵別人一樣鼓勵自己：花時間欣賞自己手臂的曲線，和跑步鍛煉出來的肌肉，這也是她最喜歡的有氧運動。